NK-92細胞，ATCC細胞，培養(yǎng)技術；NK-92懸浮細胞 在培養(yǎng)的過程中會聚團 有少量貼壁 但是貼壁很輕微 不需要胰酶消化只要槍頭輕輕吹打即可以從壁上下來?；鄯f細胞庫引進ATCC細胞庫，狀態(tài)良好，傳代次數(shù)少，提醒各...

NK-92細胞，ATCC細胞，培養(yǎng)技術；NK-92懸浮細胞 在培養(yǎng)的過程中會聚團 有少量貼壁 但是貼壁很輕微 不需要胰酶消化只要槍頭輕輕吹打即可以從壁上下來?；鄯f細胞庫引進ATCC細胞庫，狀態(tài)良好，傳代次數(shù)少，提醒各位老師，這個細胞確實難養(yǎng)哦。

NK-92細胞，ATCC細胞，培養(yǎng)技術

一．產品簡介

1、產品名稱：NK-92

2、產品規(guī)格：25cm²培養(yǎng)瓶

3、培養(yǎng)基信息：

完全培養(yǎng)基：

75%α-MEM( 成分：無核糖核苷、去脫氧核糖核苷， Gbico 貨號：12561-056）+12.5%熱滅活馬血清+12.5%進口FBS+1%P/S+0.2mM 肌醇+0.02mM 葉酸+0.1mM β-Mer+100-200U/ml IL-2

4、 培養(yǎng)條件： 37℃，5%CO₂細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

5、凍存條件：α-MEM+40% FBS+10%DMSO

二． 使用方法

1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：

取出25cm²培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，放入37℃，5%CO₂細胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或隔夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。然后，用75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，收集瓶內液體于50ml離心管中，1000rpm離心5min，棄上清，用6ml完全培養(yǎng)基重懸，全部接種到25cm²培養(yǎng)瓶中，再放入37℃，5%CO₂細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果離心后細胞量很多，可以直接1:2分瓶培養(yǎng)。

2、細胞傳代：

細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的85%及以上面積時，收集瓶內液體于15ml離心管中，1000rpm離5min，棄上清，用12ml完全培養(yǎng)基重懸細胞，按1:2的比例進行接種傳代，接種到25cm²培養(yǎng)瓶中，放入37℃，5%CO₂細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，2-3天更換培養(yǎng)液。換液的步驟同細胞 NK-92細胞，ATCC細胞，培養(yǎng)技術傳代步驟。

3、細胞凍存：

1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的85%及以上面積時，收集瓶內液體于15ml離心管中，1000rpm離心5min，棄上清，用適當量的凍存液（基礎培養(yǎng)基：FBS：DMSO=5:4:1）重懸細胞，并放置于凍存管中；

2）先將細胞凍存管放置于4℃ 0.5h，再放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃隔夜，24h后可轉入液氮中進行長期保存。

4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；

2）將凍存管中的細胞移至含有5ml完全培養(yǎng)液的15ml離心管中，然后1000rpm/min，離心5min；

3）棄上清，沉淀細胞用6ml完全培養(yǎng)基重懸，接種到培養(yǎng)瓶中，后放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4）第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

三． 注意事項

1、培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月；

2、在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作；

3、傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)；

4、如果您的實驗時間較長， 請在收到細胞后傳代時，按細胞量分種2瓶，使用其中的一瓶細胞實驗，其余的細胞先凍存起來。下次實驗需要時，再復蘇；

5、該 NK-92細胞，ATCC細胞，培養(yǎng)技術只可用于科研。

6、需要更多信息，請致電： ！

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