SY0501 Calcein-AM/PI活細(xì)胞

Calcein-AM/PI活細(xì)胞是高品質(zhì)的細(xì)胞凋亡與增殖產(chǎn)品,由北京百奧萊博供應(yīng),本產(chǎn)品僅用于生物化學(xué)研究方面,Calcein-AM/PI活細(xì)胞是我司眾多優(yōu)質(zhì)細(xì)胞凋亡與增殖之一,質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品,價(jià)格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購(gòu)。...
特別提示:包括Calcein-AM/PI活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:Calcein-AM/PI活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒
英文名稱:Calcein-AM/PI Double Stain Kit
產(chǎn)品貨號(hào):SY0501
產(chǎn)品規(guī)格:500T|1000T
Calcein-AM是一種對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,發(fā)綠色熒光(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在傳統(tǒng)的Calcein(鈣黃綠素)基礎(chǔ)上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基團(tuán),增加了疏水性,使其能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。一旦進(jìn)入細(xì)胞后,Calcein-AM(本身不發(fā)熒光)被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的性分子Calcein,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)并發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AM和CFDA)相比,由于Calcein, AM細(xì)胞毒性低,是zuì適合用于活細(xì)胞染色的熒光探針,而且不會(huì)抑制任何的細(xì)胞功能,如增殖和淋巴球的趨化性。
由于死細(xì)胞缺乏酯酶,Calcein-AM僅用于對(duì)活細(xì)胞的細(xì)胞生存能力測(cè)試和短期標(biāo)記。因此,Calcein-AM常常與死細(xì)胞熒光探針如碘化丙啶(PI)等聯(lián)合使用,同時(shí)進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞的熒光雙重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿過(guò)活細(xì)胞的細(xì)胞膜,僅能穿過(guò)死細(xì)胞膜的無(wú)序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(Ex=535 nm, Em=617 nm),因此PI僅對(duì)死細(xì)胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。而用545 nm激發(fā),僅可觀察到死細(xì)胞。
本試劑盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的雙重染料,來(lái)進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色標(biāo)記,從而進(jìn)行活細(xì)胞和死細(xì)胞水平的分析。根據(jù)我司優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)體系,單次就200μl細(xì)胞懸液進(jìn)行染色。
注意事項(xiàng)
1)由于Calcein-AM對(duì)濕度非常敏感,若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后,必須緊緊密封蓋子。建議根據(jù)單次用量,分裝密封保存。Calcein-AM工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
2)碘化丙啶(PI)有一定的致癌性,操作時(shí)一定要注意防護(hù)。若接觸到皮膚,需要立即用自來(lái)水清洗。
3)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期12個(gè)月
根據(jù)您的關(guān)注的Calcein-AM/PI活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒,您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求:
名稱:細(xì)胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒
貨號(hào):YT120
規(guī)格:50次
本試劑盒是針對(duì)細(xì)胞凋亡過(guò)程中產(chǎn)生的核小體間DNA鏈斷裂而設(shè)計(jì)的。可以非常有效地抽提zuì小片段為180-200bp的DNA ladder,同時(shí)又可以抽提到50kb以上的基因組DNA。DNA ladder也稱DNA fragmentation,是細(xì)胞凋亡的一個(gè)重要指標(biāo)。通常觀察到DNA ladder,就可以判定細(xì)胞發(fā)生了凋亡。本試劑盒足夠抽提50個(gè)細(xì)胞或組織樣品。
試劑盒組份:
樣品裂解液———30ml
蛋白酶K————130μl
10M 醋酸銨——6ml
TE——————6ml
注意事項(xiàng):需自備Tris平衡苯酚、lǜ仿和無(wú)水乙醇。
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。
名稱:TUNEL檢測(cè)陽(yáng)性對(duì)照制備試劑盒
貨號(hào):YT134
規(guī)格:10次
本試劑盒可以用于TUNEL檢測(cè)陽(yáng)性對(duì)照的制備,制備后的陽(yáng)性對(duì)照可以用于一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(YT135)的熒光,也可以用于顯色法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(YT137)的顯色檢測(cè)。DNase I可以剪切基因組DNA,使基因組DNA產(chǎn)生片段化(fragmentation)。基因組被片段化的細(xì)胞在用TUNEL法檢查時(shí)會(huì)呈陽(yáng)性染色。本試劑盒足夠制備10個(gè)陽(yáng)性對(duì)照。
試劑盒組份:
DNase I—————————10μl
Reaction Buffer(10X)——200μl
注意事項(xiàng):需自備用于TUNEL檢測(cè)的組織切片、或培養(yǎng)細(xì)胞的片子。需自備TUNEL檢測(cè)試劑盒。
儲(chǔ)存條件:-20℃。
名稱:TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒(顯色法,細(xì)胞樣本)
貨號(hào):SNM535
規(guī)格:50T|20T
名稱:Annexin V-APC/PI雙染雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
貨號(hào):KFS191
規(guī)格:20T|100T|50T
在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),而在細(xì)胞凋亡早期,細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V 被作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素APC 標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜,但對(duì)凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,PI 能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V- APC 與PI 匹配使用,就可以將處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測(cè)(不推薦用于檢測(cè)組織樣本)。
注意事項(xiàng)
1. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2. Annexin V-APC/PI 避光保存及使用。
3. PI 為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿防護(hù)服、戴手套等。
4. 本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,不推薦用于檢測(cè)組織樣本。
5. 推薦使用懸浮培養(yǎng)細(xì)胞。如果是貼壁細(xì)胞,建議適用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不當(dāng),可能引起假陽(yáng)性,而用細(xì)胞刮子會(huì)造成細(xì)胞粘連成團(tuán),而影響檢測(cè)??蓪⒁让赶蠹?xì)胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止進(jìn)一步的損傷。
6. 細(xì)胞固定后可能導(dǎo)致熒光的淬滅,請(qǐng)不要固定樣品。
7. 因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同,因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同,因此建議每次檢測(cè)均需使用未經(jīng)凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞作為對(duì)照,進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。

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