FastStar熱啟動(dòng)DNA聚合由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科學(xué)研究，我公司專注于核酸擴(kuò)增(PCR)產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的FastStar熱啟動(dòng)DNA聚合質(zhì)量可靠，批間差小，且價(jià)格公道，熱切盼望您選購(gòu)我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括FastStar熱啟動(dòng)DNA聚合酶在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：FastStar熱啟動(dòng)DNA聚合酶
英文名稱：HotStar DNA Polymerase
產(chǎn)品貨號(hào)：WE0122
產(chǎn)品規(guī)格：500U|2500U

  HotStar DNA Polymerase是抗Taq酶單克隆抗體和WE0101 Taq DNA Polymerase的混合制品，適用于Hot Start PCR。使用Taq酶抗體進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，高溫變性前由于Taq酶抗體與Taq酶結(jié)合抑制DNA聚合酶活性，能夠在低溫條件下有效抑制引物的非特異性退火及引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增。Taq酶抗體在PCR反應(yīng)zuì初的DNA變性步驟中變性，DNA聚合酶活性恢復(fù)，達(dá)到熱啟動(dòng)效果。使用本品無(wú)需特殊地對(duì)Taq酶抗體失活處理，可以在常規(guī)PCR反應(yīng)條件下使用。
  HotStar DNA Polymerase具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切酶活性，無(wú)3"→5"外切酶活性，酶延伸速度2 kb/min，可以擴(kuò)增長(zhǎng)度達(dá)5 kb的片段。擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物3"端附有一個(gè)“A”堿基，因此可直接用于T/A克隆。本產(chǎn)品具有延伸速度快、擴(kuò)增效率高的特點(diǎn)，主要適用于PCR法擴(kuò)增DNA片段、DNA序列測(cè)定等實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品組成：

組份	500U	2500U
HotStar DNA Polymerase, 5 U/μl	100μl	5×100μl
10×PCR Buffer	1.8ml	5×1.8ml

注意：本產(chǎn)品的10×PCR Buffer中含有15 mM鎂離子。

活性定義：用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物，在74℃，30分鐘內(nèi)，將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸性不溶物質(zhì)所需的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。

質(zhì)量控制：
1、經(jīng)過(guò)多次柱純化，SDS-PAGE檢測(cè)其純度大于99%；
2、經(jīng)檢測(cè)無(wú)外源核酸酶活性；
3、PCR方法檢測(cè)無(wú)宿主殘余DNA；
4、能有效地?cái)U(kuò)增人基因組中的單拷貝基因。

使用方法：
以下舉例為以人基因組DNA為模板，擴(kuò)增1 kb的片段的PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件，實(shí)際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進(jìn)行相應(yīng)的改進(jìn)和優(yōu)化。

1、PCR反應(yīng)體系

試劑	50μl反應(yīng)體系	終濃度
10×PCR Buffer	5μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
HotStar DNA Polymerase,5U/μl	0.25-0.5μl	1.25-2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：可以在室溫下配制反應(yīng)液，須將試劑置于冰上。

2、PCR反應(yīng)條件

步驟	溫度	時(shí)間	循環(huán)數(shù)
預(yù)變性	94℃	2 min
變性	94℃	30 s	25-35個(gè)循環(huán)
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
終延伸	72℃	2 min

注意：
1)一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引物的熔解溫度Tm低5℃，無(wú)法得到理想的擴(kuò)增效率時(shí)，適當(dāng)降低退火溫度。
2)延伸時(shí)間應(yīng)根據(jù)所擴(kuò)增片段大小設(shè)定。
3)可根據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物的下游應(yīng)用設(shè)定循環(huán)數(shù)。如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足；如果循環(huán)次數(shù)太多，錯(cuò)配機(jī)率會(huì)增加，非特異性背景嚴(yán)重。所以在保證產(chǎn)物得率的前提下應(yīng)盡量減少循環(huán)次數(shù)。

儲(chǔ)存條件：-20℃，避免反復(fù)凍融。

根據(jù)您的關(guān)注的FastStar熱啟動(dòng)DNA聚合酶，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：


BTN90408 即用型熒光定量PCR試劑盒 1mL
BTN100203 通用型LAMP試劑盒 50次
WE0122 FastStar熱啟動(dòng)DNA聚合酶 500U|2500U
WE0134 SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正染料) 1ml|5ml
WE0145 實(shí)時(shí)熒光定量PCR的預(yù)混體系(探針?lè)?(低含量ROX校正染料) 5ml
WE0152 快速實(shí)時(shí)熒光定量PCR的預(yù)混體系(熒光探針)(低含量ROX校正染料) 5ml
ALH241 2×Pfu PCR MasterMix 0.5ml|5ml

關(guān)注FastStar熱啟動(dòng)DNA聚合酶，的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN61203	PCR級(jí)高GC的DNA清除劑	1.5mL
BTN101005	即用型易錯(cuò)PCR試劑盒	100次
BTN131227	10nt隨機(jī)引物(0.5μg/uL)	250
BTN70906	NTP溶液(10mM)	0.5mL
BTN91106	T7體外轉(zhuǎn)錄試劑盒	50次
BTN131083	Ribo-SPIA cDNA擴(kuò)增試劑盒	20次

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