SURE化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是高品質(zhì)的克隆與表達(dá)產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于科研試驗(yàn)，SURE化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是我司眾多優(yōu)質(zhì)克隆與表達(dá)之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括SURE化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：SURE化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱：SURE Chemically Competent Cell
產(chǎn)品貨號：MQ0016
產(chǎn)品規(guī)格：10×100μl/50×100μl

真核生物DNA存在較多“十字型”、“Z 字型”等二級或三級結(jié)構(gòu)，這種DNA結(jié)構(gòu)在利用傳統(tǒng)大腸桿菌進(jìn)行克隆時易被大腸桿菌體內(nèi)的重組酶系統(tǒng)或其他防御系統(tǒng)識別并對其進(jìn)行重組，刪除等破壞，導(dǎo)致很難對這類DNA進(jìn)行正確的克隆操作。
SURE菌株可以解決這些問題：此菌株體內(nèi)重組酶系統(tǒng)整條通路被破壞，并且(McrA-，McrCB-,McrF-，Mrr-，HsdR-)這些限制性突變的存在賦予此菌株無法對外源DNA進(jìn)行標(biāo)記、限制的能力，提高了外源甲基化DNA的克隆效率，同時具有核酸酶(endA)突變、重組酶(recB recJ)突變，增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性。
存在于F′因子上的lacIqZΔM15基因使此菌株可以進(jìn)行藍(lán)白斑篩選；Kanr，Tetr賦予菌株卡那霉素和四環(huán)素抗性。SURE感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達(dá)5×108cfu/μg。
保存條件：-80℃
基因型：
E.coli B e14-(McrA-)Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)171 endA1 gyrA96 thi-1 supE44 relA1 lac recB recJ sbcC umuC::Tn5(Kanr)uvrC [F′ proAB lacIqZΔM15 Tn10(Tetr)].
操作說明：
1.SURE感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中)，加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB)，混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：
1.感受態(tài)細(xì)胞zuì好在冰上融化。
2.混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少zuì終用于涂板的菌量。
4.此菌株具有卡那霉素，四環(huán)素抗性，擁有這兩種抗性的質(zhì)粒無法使用；對<40 μg/ml氯霉素有抗性，但對100 μg/ml氯霉素敏感。使用其他抗生素參考濃度：氨芐青霉素(終濃度：100 μg/ml)，氯霉素(終濃度：100 μg/ml)。
5.SURE感受態(tài)細(xì)胞采用常規(guī)轉(zhuǎn)化方法，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)5×108cfu/μg。

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貨號	名稱	規(guī)格
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YT474	pression/YT474.html" target="_blank">N端CFP標(biāo)簽融合蛋白質(zhì)粒(青色熒光蛋白)	1μg
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QN1057	pression/QN1057.html" target="_blank">20×SSC緩沖液，pH5.3	100mL|500mL
MQ0046	pression/MQ0046.html" target="_blank">Rosetta-gami 2(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞	10×100μl/50×100μl

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