全血總RNA提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研目的，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要全血總RNA提取試劑盒等RNA提取純化產(chǎn)品的客戶，請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括全血總RNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：全血總RNA提取試劑盒
英文名稱：Total RNA Extraction Kit From Blood
產(chǎn)品貨號(hào)：ALH015
產(chǎn)品規(guī)格：20次|50次

本試劑盒使用紅細(xì)胞裂解液選擇性裂解紅細(xì)胞,然后獨(dú)特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解白細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶，然后用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后,RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜， 再通過(guò)一系列快速的漂洗－離心的步驟, 去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物，蛋白等雜質(zhì)去除， zuì后低鹽的RNase free H20將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。

產(chǎn)品組分：

組份	20次	50次
10X紅細(xì)胞裂解液RLB	10ml	25ml
裂解液RLT	25ml	50ml
去蛋白液RW1	15ml	25ml
漂洗液RW	5ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
70%乙醇	4ml RNase-free H2O	9ml RNase-free H2O
吸附柱和收集管	20套	50套

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異小，可重復(fù)性好?？朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯f(wàn)ǎng等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
3.反復(fù)優(yōu)化的紅細(xì)胞裂解液配方,裂解效果快速完全。
4.快速，簡(jiǎn)捷，單個(gè)樣品操作一般可在40分鐘內(nèi)完成。
5.多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9～2.0，基本無(wú)DNA殘留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各種實(shí)驗(yàn)。

儲(chǔ)存條件：室溫，有效期12個(gè)月。

注意事項(xiàng)
1. 次使用前請(qǐng)先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入量乙醇，加入后請(qǐng)及時(shí)打鉤標(biāo)記已加入乙醇，以免多次加入!
2. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13000rpm的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī)，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。
3. 需要自備乙醇, β-巰基乙醇,一次性注射器,研缽。
4. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5. 預(yù)防RNase 污染，應(yīng)注意以下幾方面：
1) 經(jīng)常更換新手套。因?yàn)槠つw經(jīng)常帶有細(xì)菌，可能導(dǎo)致RNase 污染。
2) 使用無(wú)RNase 的塑料制品和槍頭避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液RLT 中時(shí)不會(huì)被RNase 降解。但提取后繼續(xù)處理過(guò)程中應(yīng)使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 小時(shí)，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分鐘，然后用水徹底清洗，再滅菌，即可去除RNase。
4) 配制溶液應(yīng)使用無(wú)RNase 的水。（將水加入到干凈的玻璃瓶中，加入DEPC 至終濃度0.1%( v/v)，37℃放置過(guò)夜，高壓滅菌。）
6. 關(guān)于DNA 的微量殘留：一般說(shuō)來(lái)任何總RNA 提取試劑在提取過(guò)程中無(wú)法完全避免DNA 的微量殘留,本公司的RNA提取產(chǎn)品，由于采取了本公司獨(dú)特的緩沖體系和選擇了特殊吸附能力的吸附膜，在大多數(shù)RT-PCR 擴(kuò)增過(guò)程中其微量的DNA 殘留（一般電泳EB 染色紫外燈下觀察不可見）影響不是很大, 如果要進(jìn)行嚴(yán)格的mRNA 表達(dá)量分析如熒光定量PCR,我們建議在進(jìn)行模板和引物的選擇時(shí)：
1) 選用跨內(nèi)含子的引物,以穿過(guò)mRNA 中的連接區(qū),這樣DNA 就不能作為模板參與擴(kuò)增反應(yīng)。
2) 選擇基因組DNA 和cDNA 上擴(kuò)增的產(chǎn)物大小不一樣的引物對(duì)。
3) 將RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 處理。本試劑盒還可以用于DNase I 處理后的RNA 清潔,請(qǐng)聯(lián)系我們索取具體操作說(shuō)明書。
4) 在步驟去蛋白液RW1 漂洗前，直接在吸附柱上進(jìn)行DNase I 處理。請(qǐng)聯(lián)系我們索取具體操作說(shuō)明書。
7. RNA 純度及濃度檢測(cè)：

完整性： RNA 可用普通瓊脂糖凝膠電泳(電泳條件：膠濃度1.2%；0.5×TBE 電泳緩沖液；150v，15 分鐘)檢測(cè)完整性。由于細(xì)胞中70%-80%的RNA 為rRNA，電泳后UV 下應(yīng)能看到非常明顯的rRNA 條帶。動(dòng)物rRNA 大小分別約為5 kb 和2kb，分別相當(dāng)于28S 和18S rRNA。動(dòng)物RNA 樣品中zuì大rRNA 亮度應(yīng)為次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否則表示RNA 樣品的降解。出現(xiàn)彌散片狀或條帶消失表明樣品嚴(yán)重降解。

純度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白質(zhì)污染程度的指標(biāo)。高質(zhì)量的RNA，OD260/OD280 讀數(shù)（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之間。OD260/OD280 讀數(shù)受測(cè)定所用溶液的pH 值影響。同一個(gè)RNA 樣品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中測(cè)出的OD260/OD280 讀數(shù)1.8-2.1 之間，在水溶液中所測(cè)讀數(shù)則可能在1.5-1.9之間，但這并不表示RNA 不純。

濃度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀釋n 倍，用RNase-free 水將分光光度計(jì)調(diào)零，取稀釋液進(jìn)行OD260, OD280 測(cè)定，按照以下公式進(jìn)行RNA濃度的計(jì)算：終濃度（ng/μl）= (OD260)×(稀釋倍數(shù)n)×40

本制品別名：血液RNA提取試劑盒|全血RNA提取試劑盒|血液總RNA提取試劑盒|血液總RNA純化分離試劑盒

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN110810	病毒沉淀劑	100mL
BTN91103	非凍型拭子病毒保存液	100mL
BTN71201	動(dòng)物RNA提取試劑盒(柱式Trizol)	50次
BTN130972	miRNA分離純化試劑盒(凝膠法)	50次
BTN130977	生物素化的Oligo(dT)	5μg
BTN90318	柱式DNA清除劑	50次
BTN80918	Tris鹽酸溶液(1M,pH8.5)(RNase-free)	250mL

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名稱：石蠟包埋組織RNA提取試劑盒
貨號(hào)：BTN81102
規(guī)格：30次
石蠟包埋組織本是珍貴的分子生物學(xué)研究材料，但是由于它們的保存時(shí)間一般都比較長(zhǎng)，很不容易從中提取到可以進(jìn)行PCR的RNA，存在的主要問(wèn)題是RNA的降解和脫蠟過(guò)程中樣品的丟失。本產(chǎn)品是專門用于從甲醛和非甲醛固定的石蠟包埋組織中快提RNA的試劑

試劑盒特點(diǎn)：
1.一管式操作，避免了可能的交叉污染和樣品RNA的丟失。
2.含一步離心式脫蠟試劑，不需要使用有毒的二甲苯，健康環(huán)保。
3. 能有效去除基因組DNA的污染，得到的RNA可直接用于RT-PCR反應(yīng)。
4. 即開即用，客戶自己不需要準(zhǔn)備額外的試劑。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	30mL
溶液B	3mL
溶液C	5mL
溶液D	15mL
微量核酸沉淀劑	30mL
RNase-free水	10mL
說(shuō)明書	1份

儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸，4℃保存(溶液C需要-20℃放置)，有效期一年。

使用方法：
1. 將5片厚度為6-8μM的石蠟包埋組織切片轉(zhuǎn)移到1.5mL塑料離心管(zuì好使用螺旋蓋離心管)中并加入1mL溶液A，在振蕩器上以zuì大速度振蕩10秒。
2. 加入75μL溶液B，在振蕩器上以zuì大速度振蕩10秒。
3. 7000×g室溫離心2分鐘，溶液將形成兩個(gè)相，其中組織切片位于下相。
4.小心吸棄上層液體。
5. 將離心管放入真空離心機(jī)中抽干下層的液體，一般需要一小時(shí)。
6. 加入150μL溶液C，55℃保溫過(guò)夜。
7. 短暫離心，95℃保溫10分鐘。
8. 加入0.5mL溶液D，充分震蕩半分鐘。
9. 加入0.1mL自備氯f(wàn)ǎng，振蕩器上充分振蕩混均30秒。
10. 13000-5000×g室溫離心3～5分鐘。
11. 將上清液(約0.6mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中。下層有機(jī)相(藍(lán)色)和中間層含有DNA和蛋白質(zhì)，避免觸及，否則將產(chǎn)生蛋白質(zhì)和DNA污染。為保險(xiǎn)起見，可以留下100μL上清液不取。同時(shí)吸取上清時(shí)zuì好緩慢進(jìn)行，否則容易吸出交界面的不可見的DNA。
12.在上清液中加入兩倍體積的微量核酸沉淀劑，振蕩器上振蕩30秒混勻。
13. 13000-15000g室溫離心5分鐘，離心底的側(cè)面將形成RNA沉淀。如果需要提高RNA回收率，可以將離心時(shí)間延長(zhǎng)到20或30分鐘。
14.小心吸棄上清液，注意不要吸棄RNA沉淀。
15.在含RNA沉淀的離心管中加入1mL自備的75%乙醇，振蕩混勻30秒。
16. 13000-15000g室溫離心1分鐘。
17.小心吸棄上清液，注意不要吸棄RNA沉淀。
18. 短暫快速離心，用移液槍小心吸棄殘留乙醇(約50μL)。注意不要吸棄沉淀。此步十分重要，否則殘留的乙醇會(huì)影響RNA的使用。
19.室溫放1-2分鐘后立即加入50-100μL RNA溶解液使RNA沉淀溶解。千萬(wàn)不要用真空離心法使RNA沉淀過(guò)于干燥，否則RNA將變得十分難溶。樣品立即使用或存放于-80℃待用。
20. RNA完整性的電泳檢測(cè)：
21. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測(cè)定：將5-10μL RNA溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2之間)檢測(cè)其在OD260的光吸收。通過(guò)光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，進(jìn)而計(jì)算出RNA的產(chǎn)量(濃度×體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。
22. RNA純度測(cè)定：無(wú)污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān))，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。

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