Caspase 8熒光法檢測(cè)試劑盒(AFC)由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要Caspase 8熒光法檢測(cè)試劑盒(AFC)等細(xì)胞凋亡與增殖產(chǎn)品的客戶，請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括Caspase 8熒光法檢測(cè)試劑盒(AFC)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：Caspase 8熒光法檢測(cè)試劑盒(AFC)
英文名稱：Caspase-8 Fluorescence Metric Assay
產(chǎn)品貨號(hào)：KFS203
產(chǎn)品規(guī)格：20T|50T|100T

本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織Caspase-8 檢測(cè)。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過(guò)程中起著非常重要的作用，其中Caspase-8 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子，與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-8 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中，沒(méi)有活性；但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段，它被激活，活化的Caspase-8 由兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基組成，裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物，zuì終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-8 熒光檢測(cè)試劑盒就是將Caspase-8 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)。當(dāng)?shù)孜锉籆aspase-8 剪切后，發(fā)色基團(tuán)即游離出來(lái)，可通過(guò)熒光酶標(biāo)儀測(cè)定其熒光強(qiáng)度（激發(fā)波長(zhǎng)=485nm,發(fā)射波長(zhǎng)=535nm）。

注意事項(xiàng)
1. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用。
2. 對(duì)某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-8 活化的機(jī)制，這種情況時(shí)利用本試劑盒檢測(cè)Caspase-8 活性無(wú)明顯改變，需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號(hào)通路。
3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×106 個(gè)或新鮮組織50~100mg，以便能達(dá)到測(cè)定需要的100~200μg 蛋白的要求，因?yàn)镃aspase-8 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān)，如測(cè)定的RFU 值偏低，可以通過(guò)適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)的時(shí)間，如果值還是不高，可通過(guò)增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來(lái)提高蛋白量。

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
SNM525	線粒體蛋白提取試劑盒	100T|50T
KFS184	Annexin V-APC/SytoX雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒	20T|50T|100T
KFS190	Annexin V-APC/7-AAD雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒	10T|20T|50T|100T
KFS193	Annexin V-kFluor555/7-AAD雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒	10T|20T|50T|100T
KFS340	微核分析/遺傳毒性分析熒光染料	10mg
SY0491	碘化丙啶染液(1mg/ml)	1ml

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名稱：Caspase-8活性檢測(cè)試劑盒(分光光度法)
貨號(hào)：SNM511
規(guī)格：100T|50T|20T

名稱：TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(FITC標(biāo)記POD法,通用)
貨號(hào)：KFS197
規(guī)格：20T|50T|100T
TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（FITC 標(biāo)記/POD 法）是用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞在凋亡過(guò)程中細(xì)胞核DNA 的斷裂情況，其原理是生物素（biotin）標(biāo)記的dUTP 在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以連接到凋亡細(xì)胞中斷裂DNA 的3’-OH 末端，再以streptavidin-FITC 與生物素結(jié)合，使結(jié)果可用熒光顯微鏡檢測(cè)；熒光素亦可被偶聯(lián)過(guò)氧化物酶Peroxidase（POD）的抗熒光素抗體(POD-conjugated Anti-FITC)標(biāo)記,在POD 底物二氨基聯(lián)苯胺（DAB）的存在下，產(chǎn)生很強(qiáng)的顏色反應(yīng)（呈棕色），特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞，因而在普通光學(xué)顯微鏡下即可觀察和計(jì)數(shù)凋亡細(xì)胞。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒(méi)有DNA 的斷裂，因而沒(méi)有3’-OH 形成，很少能夠被標(biāo)記或染色。

注意事項(xiàng)
1. 各個(gè)樣本請(qǐng)用免疫組化筆做好標(biāo)記，另外加2 張樣本切片分別用于陽(yáng)性片和陰性片制備并做好標(biāo)記。
2. 在每步反應(yīng)或浸洗的間隙時(shí)，配制下一步即用的工作液。
3. 反應(yīng)液zuì好根椐計(jì)算好的樣本數(shù)量集中配制，再分別滴加于各樣本上，避免因每個(gè)樣本單獨(dú)配制而產(chǎn)生的試劑損耗，TdT 酶反應(yīng)液如需短暫保存時(shí)，請(qǐng)置于冰上。
4. 配制好的DAB 工作液應(yīng)為淺棕色，如顏色過(guò)深，請(qǐng)勿使用。
5. 操作請(qǐng)戴手套，防止試劑沾染皮膚，如有沾染請(qǐng)立即用大量清水沖洗。

名稱：WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)：KFS319
規(guī)格：100T|500T
疊氮類四唑鹽是一種類似于MTT 的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶能夠被還原成橙黃色水溶性的甲月贊。生成的甲臜能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成正比。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。

此法是用于測(cè)定細(xì)胞增殖或毒性試驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度、高穩(wěn)定性且無(wú)放射性的比色檢測(cè)法。實(shí)驗(yàn)的靈敏度比其它四唑鹽如MTT, XTT, MTS 高，線性范圍更寬。

我司四唑鹽對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。加入我司四唑鹽顯色后，可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板，使檢測(cè)時(shí)間更加靈活，便于找到zuì佳測(cè)定時(shí)間。

注意事項(xiàng)
1. 本試劑盒的檢測(cè)依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)，如果待檢測(cè)體系中存在較多的還原劑，例如一些抗氧化劑會(huì)干擾檢測(cè)，需設(shè)法去除。
2. 如果待測(cè)溶液有還原性，測(cè)定不含細(xì)胞，但含有我司四唑鹽的待測(cè)溶液在450 nm 處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入我司四唑鹽，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的100 μl 培養(yǎng)基和10 μl 我司四唑鹽進(jìn)行檢測(cè)。
3. 用酶標(biāo)儀檢測(cè)前請(qǐng)確?？變?nèi)沒(méi)有氣泡，否則會(huì)干擾測(cè)定。
4. 為保證您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

操作方法
1. 96 孔板加入細(xì)胞100μL/孔（約1×104），置37℃ 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時(shí)。
2. 加入適當(dāng)濃度的受試化合物。
3. 將96 孔板在37℃，含5% CO2 空氣及濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4. 向各孔中加入10 μl 的我司四唑鹽工作液。
5. 37℃下孵育1～4 小時(shí)。
6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度。

結(jié)果分析
1. 細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加我司四唑鹽，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加我司四唑鹽，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
2. 求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。

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