氨基磁珠(5μm,10mg/ml)由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，僅用于生物化學(xué)研究方面，我公司專注于磁珠微球產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的氨基磁珠(5μm,10mg/ml)質(zhì)量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括氨基磁珠(5μm,10mg/ml)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：氨基磁珠(5μm,10mg/ml)
產(chǎn)品貨號：CZ033
產(chǎn)品規(guī)格：5ml/50ml

產(chǎn)品簡介：
Mag NH2系列磁珠具有超順磁性、快速磁響應(yīng)性、豐富氨基官能團(tuán)、單分散性和亞微米尺度粒徑等特點，能夠在特殊化學(xué)試劑(如戊二醛)的作用下將多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物配體共價偶聯(lián)到微球表面，是醫(yī)學(xué)與分子生物學(xué)研究中重要的載體工具。
NH2系列磁珠采用的高分子聚合技術(shù)將超順磁性材料和高分子材料地結(jié)合在一起，形成的一種功能化磁性微球。與傳統(tǒng)磁珠相比，Magrose具有更快的磁響應(yīng)性同時保持微球良好的分散性、低的非特異性吸附和更豐富的結(jié)合位點等特性，能便捷地與多種生物配體(蛋白、多肽、寡聚核苷酸、藥物分子等)進(jìn)行高載量結(jié)合，可作為良好的基礎(chǔ)材料進(jìn)行包被、吸附、化學(xué)改性等后續(xù)處理。
保質(zhì)期：在2～8℃可穩(wěn)定保存，保質(zhì)期2年
產(chǎn)品：
1. 豐富的結(jié)合位點，加強與配體的特異性結(jié)合。
2. 超順磁性和高磁響應(yīng)性，節(jié)省操作時間。
3. 良好的分散性和重懸性，提高操作的便捷性。
4. 良好的物理化學(xué)穩(wěn)定性，保障重復(fù)性效果。
磁珠與生物分子的偶聯(lián)方法(參考，以蛋白A為例)：
1. 磁珠預(yù)處理：混勻磁珠后，取100 μL Mag / Magrose磁珠到1 mL EP管中，磁吸去除上清液，用200 μL PBS溶液(50 mM PBS，pH 7.4)洗滌3次，磁吸去上清；
2. 戊二醛活化：加入新鮮配制的100 μL戊二醛溶液(15%)到EP管中，漩渦混勻使磁珠充分懸浮，用錫箔紙包裹后25℃反應(yīng)1 h(反應(yīng)避光，以避免戊二醛自身發(fā)生聚合)，該期間保持磁珠的懸浮狀態(tài)(可利用垂直混合儀進(jìn)行顛倒混勻)；
3. 活化后洗滌：磁珠活化后，磁吸去上清，用50 mM PBS，pH 7.4緩沖液洗滌3次；
4. 磁珠偶聯(lián)：向裝有磁珠的EP管中加入50 μg～200 μg生物配體(合適用量及濃度需要根據(jù)具體實驗進(jìn)行優(yōu)化，保持溶液pH≈8.0，必要時可加入0.05% Tween -20以提高磁珠分散性)，輕柔地混
勻；用錫箔紙包裹(反應(yīng)避光)后25℃偶聯(lián)3 h，或25℃偶聯(lián)1 h后放置4℃偶聯(lián)過夜，偶聯(lián)期間保持磁珠的懸浮狀態(tài)(可利用垂直混合儀進(jìn)行顛倒混勻)；
注：由于戊二醛溶液在280 nm出有吸收峰，因此磁珠上偶聯(lián)蛋白的結(jié)合含量不能通過反應(yīng)前后OD280值變化來計算，可通過BCA試劑盒或蛋白電泳法間接測量。
5. 偶聯(lián)后封閉：將EP管置于磁分離架上磁性分離去除上清液，加入200～1000 μL BSA/PBS溶液(pH 7.2，含5% BSA)重懸磁珠(可根據(jù)需要進(jìn)行超聲)，25℃反應(yīng)1 h封閉磁珠表面非特異性吸附位點，該期間保持磁珠的懸浮狀態(tài)(可利用垂直混合儀進(jìn)行顛倒混勻)；
6. 保存：將EP管置于磁性分離架上磁性分離去除上清液，用200 μL PBS溶液(pH 7.2)或保存溶液洗滌3次后，重新懸浮于保存溶液中(可根據(jù)需要來確定保存溶液的加入量，以調(diào)整偶聯(lián)配體磁珠的濃度)，zuì后保存于4℃。必要時可以在保存溶液中加入0.02%(w/v) 疊氮化鈉(NaN3)抑制細(xì)菌生長。
注意事項：
1. 冷凍、干燥和離心等操作會引起磁珠團(tuán)聚，不易于重懸和分散，并且影響磁珠表面功能基團(tuán)的化學(xué)活性。
2. 在使用本產(chǎn)品前，請務(wù)必充分振蕩或超聲使磁珠保持均勻的懸浮狀態(tài)。
3. 使用過程中可根據(jù)需求，用純化水或緩沖液磁吸洗滌磁珠 2～3次，以去除保存液中乙醇。
4. 本產(chǎn)品需與磁性分離設(shè)備配套使用。
5. 為保證zuì佳的實驗結(jié)果，請選用合適的配體進(jìn)行共價偶聯(lián)反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品僅供研究使用。

根據(jù)您的關(guān)注的氨基磁珠(5μm,10mg/ml)，氨基磁珠(5μm,10mg/ml)，氨基磁珠，5μm,10mg/ml，CZ033，百奧萊博，，，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：


CZ005 鎳離子螯和His-tag蛋白純化磁珠 5ml/2×50ml/4×250ml
CZ008 Strep-tag II蛋白純化磁珠 5ml/50ml/250ml
CZ016 1μm鏈霉親和素磁珠 1ml/10ml/100ml
CZ017 2μm鏈霉親和素磁珠 1ml/10ml/100ml
CZ018 Mag NHS磁珠 1ml/5ml/50ml
CZ019 NHS磁珠 1ml/5ml/50ml
CZ022 羥基磁珠(500nm,10mg/ml) 5ml/50ml
CZ024 羥基磁珠(1000nm,20mg/ml) 5ml/50ml

關(guān)注氨基磁珠(5μm,10mg/ml)，氨基磁珠(5μm,10mg/ml)，氨基磁珠，5μm,10mg/ml，CZ033，百奧萊博，，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：



名稱：GST融合蛋白純化磁珠
貨號：CZ007
規(guī)格：5ml/2×50ml/4×250ml
產(chǎn)品簡介：
GST融合蛋白純化磁珠是專為、快速純化谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(GST)融合蛋白而設(shè)計的一種功能化材料，可通過磁性分離方式直接從生物樣品中一步純化出高純度的目標(biāo)蛋白，大地簡化純化工藝和提高純化效率，適合科研和工業(yè)領(lǐng)域便捷地進(jìn)行GST融合蛋白的純化。
與傳統(tǒng)的柱層析純化方式相比，采用磁珠純化GST融合蛋白，無需對粗蛋白樣品進(jìn)行多次長時間的高速離心及濾膜過濾、無需控制流速、更不需要昂貴的層析設(shè)備。樣品與磁珠的特異性結(jié)合、洗滌及目標(biāo)蛋白洗脫變得非常簡單、快速、易操作。對于熟練的操作者而言，在1 h內(nèi)就能獲得高純度的目的蛋白，且能輕松實現(xiàn)高通量和大規(guī)模樣品的平行處理，為研究者節(jié)省了時間和成本。
適用范圍:
適用于谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(GST)融合蛋白、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶以及與谷胱甘肽有親和作用的其它蛋白的分離純化。
操作流程:
目標(biāo)蛋白與磁珠的結(jié)合性能將直接影響目標(biāo)蛋白的純化效率，各種緩沖液配制也將在一定程度上影響目標(biāo)蛋白的回收率和純度。因此，在較大規(guī)模蛋白純化之前，用戶應(yīng)該自行設(shè)計實驗，篩選出適合目標(biāo)蛋白的緩沖液，包括Binding /Washing Buffer(Buffer A)及Elution Buffer(Buffer B)。以下提供一個較強結(jié)合力的 GST標(biāo)簽蛋白的純化流程，供用戶參考。
1.緩沖溶液配制
Buffer A：140 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，1.8 mM KH2PO4，pH 7.4
Buffer B：50 mM Tris-HCl，10 mM還原型谷胱甘肽，pH 8.0配制方法：0.1 M Tris溶液 50 mL，0.307 g還原型谷胱甘肽，然后用0.1 M鹽酸調(diào)pH到8.0，加去離子水至100 mL。
注：1. 還原型谷胱甘肽容易被氧化，Buffer B要求現(xiàn)配現(xiàn)用；
2.不同的GST 融合蛋白與磁珠結(jié)合的強弱程度不同，對大部分的GST融合蛋白，使用含有10 mM還原性谷胱甘肽的Buffer B即可洗脫目標(biāo)蛋白；對少數(shù)結(jié)合能力較強的GST融合蛋白，可以適當(dāng)延長洗脫時間，增加洗脫次數(shù)，或提高Buffer B中還原型谷胱甘肽的濃度；
3. Buffer A和Buffer B中可以添加1～5 mM EDTA、1～10 mM DTT、0.1～1.0% Triton X-100、0.1～1.0% Tween 20等，以提高目標(biāo)蛋白的穩(wěn)定性。
2. 樣品處理
本說明書提供以下三種樣品的處理方法：
(1)大腸桿菌、酵母等細(xì)胞內(nèi)表達(dá)蛋白：表達(dá)細(xì)胞用適量Buffer A稀釋，加入蛋白酶抑制劑(如終濃度為 1 mM的PMSF)；冰浴超聲裂解細(xì)胞，即為粗蛋白樣品。如果樣品過于粘稠，可根據(jù)需要在粗樣品中加入適量核酸酶，在冰上放置30 min，以降解核酸。另外，如果目標(biāo)蛋白含量較低，建議將粗蛋白樣品進(jìn)行離心操作。
(2)胞外表達(dá)蛋白：取胞外表達(dá)上清，用等量Buffer A稀釋平衡，即為粗蛋白樣品。
(3)動物細(xì)胞胞內(nèi)表達(dá)蛋白：取適量動物細(xì)胞，用適量PBS洗滌1次，棄上清；用適量含1%(v/v)Triton X-100或1%(v/v)NP-40的Buffer A重懸；加入蛋白酶抑制劑(如終濃度為1 mM的PMSF)；置于冰上10 min，即為粗蛋白樣品。
3.磁珠預(yù)處理
一般情況下，磁珠的使用量是由用戶根據(jù)目標(biāo)蛋白產(chǎn)量和磁珠載量信息計算獲得。例如：采用大腸桿菌表達(dá)某目標(biāo)蛋白，250 mL發(fā)酵液收獲1 g濕重的菌體，通過預(yù)實驗估算其目標(biāo)蛋白產(chǎn)量為5～10 mg，用戶需要取10 mL 10%的磁珠懸液用于目標(biāo)蛋白的純化。以下即以此為例進(jìn)行詳細(xì)說明：
(1)將磁珠產(chǎn)品置于漩渦混勻器上充分混勻，用移液器取10 mL磁珠懸液于離心管中；
(2)將離心管置于磁性分離器上，待溶液變澄清后，移去上清液；
(3)加入5～10 mL Buffer A到上述裝有磁珠的離心管中，蓋緊蓋子，漩渦振蕩15 s，使磁珠重新懸浮。將離心管置于磁性分離器上，磁性分離＊，移去上清液，重復(fù)洗滌2次。
(*注：在磁性分離過程中，為了減少磁珠在使用過程中的損耗，待溶液變澄清后，蓋緊離心管蓋子，保持離心管仍在磁性分離器上，手持磁性分離器與離心管上下翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使澄清的溶液涮洗離心管蓋上殘留的磁珠，靜置片刻，使溶液重新變澄清；以下同。)
4.目標(biāo)蛋白與磁珠結(jié)合
(1)用10 mL Buffer A懸浮1 g濕重的菌體，進(jìn)行破碎和裂解后，即為粗蛋白樣品；
(2)將粗蛋白樣品加入到裝有預(yù)處理磁珠的離心管中，蓋緊離心管蓋；
(3)將離心管置于漩渦混勻器振蕩15 s，然后置于旋轉(zhuǎn)混合儀上，室溫旋轉(zhuǎn)混合20～30 min(如果需要，可在2～8℃的低溫環(huán)境下旋轉(zhuǎn)混合約1 h，防止目標(biāo)蛋白降解)；
(4)將離心管置于磁性分離器上進(jìn)行磁性分離，移出上清液到新的離心管中以備后續(xù)檢測。從磁性分離器上取下離心管進(jìn)行后續(xù)洗滌步驟。
5. 磁珠洗滌
(1)加入5～10 mL Buffer A到裝有磁珠的離心管中，旋轉(zhuǎn)混合2 min，磁性分離，移出清洗液到新的離心管中，以備取樣檢測；
(2)加入5～10 mL Buffer A到裝有磁珠的離心管，使磁珠重新懸浮，將磁珠懸液轉(zhuǎn)移至新的離心管，避免原離心管壁上非特異性吸附蛋白污染目標(biāo)蛋白；磁性分離，移出上清液到清洗液收集管。
6.目標(biāo)蛋白洗脫
(1)加入2～5 mL Buffer B(用戶可根據(jù)需要改變洗脫體積調(diào)整目標(biāo)蛋白濃度)于離心管中，蓋緊離心管蓋，然后將離心管置于旋轉(zhuǎn)混合儀上，室溫旋轉(zhuǎn)混合2 min；磁性分離，收集洗脫液到新的離心管中，即為純化的目標(biāo)蛋白樣品；
(2)如果需要，可以重復(fù)上述步驟1次，收集樣品到新的離心管中，以檢測目標(biāo)蛋白是否洗脫完全。
7.磁珠清洗和保存
磁珠使用后經(jīng)過簡單清洗處理后，可以繼續(xù)用于后續(xù)的純化操作，也可以長時間保存。用戶可根據(jù)磁珠使用的情況選擇不同的清洗方法，主要有以下幾種情況：
情況1：重復(fù)使用次數(shù)較少，結(jié)合能力下降不明顯時，可以采用高pH和低pH buffer交替洗滌的方式進(jìn)行清洗
(1)高pH洗(堿洗)：使用后的磁珠加入10 mL Buffer C(即0.1 M Tris-HCl，0.5 M NaCl，pH 8.5)，漩渦振蕩60 s，磁性分離，去除上清液—；
(2)低pH洗(酸洗)加入10 mL Buffer D(即0.1 M 醋酸鈉，0.5 M NaCl，pH 4.5)，漩渦振蕩60 s，磁性分離，去除上清液；
(3)重復(fù)堿洗、酸洗交替清洗2次，共3次。
情況2： 重復(fù)使用次數(shù)較多時，由于沉淀、變性或非特異性吸附蛋白積累，導(dǎo)致磁珠結(jié)合目標(biāo)蛋白的能力明顯下降。去除沉淀或變性蛋白，可按下面的方法進(jìn)行洗滌：
(1)先用5 mL 6 M鹽酸胍洗滌2次，每次漩渦振蕩60 s，磁性分離，去除上清液；
(2)再用10 mL 1×PBS洗滌3次，每次漩渦振蕩60 s，磁性分離，去除上清液。
情況3：去除疏水性結(jié)合物質(zhì)，可按下面的方法進(jìn)行洗滌：
(1)先用5 mL 70%乙醇或濃度為0.1%的非離子型表面活性劑洗滌3次，每次漩渦振蕩60 s，磁性分離，去除上清液；
(2)再用10 mL 1×PBS洗滌3次，每次漩渦振蕩60 s，磁性分離，去除上清液。
注：完成情況1或情況2的清洗操作后，如果用戶需要繼續(xù)使用磁珠用于蛋白純化，需先用Buffer A洗滌2～3次。 如果不需要繼續(xù)使用，則用20%乙醇洗滌磁珠2～3次后，再加入20%(v/v)乙醇到磁珠中使總體積為10 mL，保存于2～8°C。
蛋白純化流程的優(yōu)化：
以上操作流程適用于大部分GST融合蛋白的純化，根據(jù)目標(biāo)蛋白與GST融合蛋白純化磁珠的結(jié)合性能不同，用戶可以從以下幾個方面對純化流程進(jìn)行優(yōu)化，以提高目標(biāo)蛋白的回收率和純度。
1. 提高目標(biāo)蛋白回收率的參考方法：
(1)延長蛋白溶液與磁珠孵育的時間；
(2)樣品及緩沖液中加入1～10 mM的DTT，有助于提高部分GST融合蛋白與磁珠的結(jié)合；
(3)添加合適的蛋白酶抑制劑，防止目標(biāo)蛋白降解；
(4)增加磁珠用量；
(5)延長洗脫目標(biāo)蛋白的時間或增加洗脫次數(shù)；
(6)使用新鮮配制的Buffer B保證目標(biāo)蛋白洗脫效率。
2. 提高目標(biāo)蛋白純度的參考方法：
(1)避免劇烈的超聲破碎造成GST標(biāo)簽與目標(biāo)蛋白發(fā)生斷裂；
(2)在純化過程中添加合適的蛋白酶抑制劑，防止目標(biāo)蛋白降解；
(3)在樣品溶液和緩沖液中加入 0.1%的Tween20或2% 的NP-40可降低非特異蛋白的吸附；
(4)延長洗滌時間，增加洗滌次數(shù)；
(5)采用梯度濃度還原型谷胱甘肽洗脫目標(biāo)蛋白。
注意事項：
(1)次使用本產(chǎn)品前，請務(wù)必詳細(xì)閱讀本用戶手冊；
(2)磁珠使用和保存過程中應(yīng)避免冷凍、干燥和高速離心等操作；
(3)在使用本產(chǎn)品前，請務(wù)必充分振蕩使磁珠保持均勻的懸浮狀態(tài)；
(4)請選用質(zhì)量好的移液器吸頭和離心管，以免磁珠貼壁或混合過程發(fā)生滲漏引起磁珠的損耗；
(5)磁珠與溶液混合過程中，如果溶液粘稠無法通過翻轉(zhuǎn)離心管重懸磁珠，可采用移液器反復(fù)吹吸或短時漩渦混合使磁珠充分重懸；
(6)用戶可根據(jù)實際需要保留經(jīng)磁性分離移去的上清液，進(jìn)行取樣檢測，以便分析純化過程和優(yōu)化蛋白純化流程；
(7)本產(chǎn)品可以重復(fù)使用，重復(fù)使用時，建議純化同種蛋白，純化不同種類的蛋白時，建議使用新的磁珠，以防交叉污染；
(8)本產(chǎn)品需與磁性分離器配套使用；
(9)本產(chǎn)品僅供研究使用。

如果您覺得“CZ033 氨基磁珠”描述資料不夠齊全，請聯(lián)系我們獲取詳細(xì)資料。(聯(lián)系時請告訴我從給覽網(wǎng)看到的，我們將給您最大優(yōu)惠！)
本頁鏈接：http://www.mingjiewl.com/com_bjbiolab/sell/itemid-8506916.html
已經(jīng)有1285位訪客查看了本頁.