產(chǎn)品簡介
豬腫瘤壞死因子(TNF-)ELISA試劑盒使用目的: 為定量(性)測定活化的目標濃度的血清,血漿,組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清及其他生物液體
公司簡介
上海仁捷生物科技有限公司 霍 手機17302193538 QQ:2450878877 座機:021-60346444
上海仁捷生物科技有限公司專業(yè)經(jīng)營生產(chǎn)ELISA試劑盒,科研化試劑、分析試劑 ,代理許多國際先進水平的高科技產(chǎn)品,包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、診斷等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。我們努力將歐美專業(yè)生產(chǎn)廠家的具有國際先進水平的產(chǎn)品推薦給各類研究人員;另一方面也非常重視自主產(chǎn)品研究和開發(fā),推出了一系列具有競爭力的產(chǎn)品和服務(wù)。同時國家對于生物行業(yè)的發(fā)展給予了極大的重視,更多地側(cè)重于科研的投入。
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展開
產(chǎn)品說明
豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
使用目的:
為定量(性)測定活化的目標濃度的血清,血漿,組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清及其他生物液體。研究使用不是用于診斷或治療程序。
如果你有任何問題,請聯(lián)系上海義森生物科技有限公司。
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被目標物抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標物呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣本處理及要求
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于2000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8℃ 2000g離心30分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:2000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
Elisa Biotech生產(chǎn)的各項指標ELISA試劑盒的檢測范圍適中。經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),因此,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。
需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標儀(450nm)
2. 加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
試劑盒組成 名稱 96孔配置 48孔配置 備注
微孔酶標板 12孔×8條 12孔×4條 無
標準品 0.5mL*6管 0.5mL*6管 按說明書復(fù)溶
樣本稀釋液 10mL 10mL 無
檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無
20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書稀釋
底物A 6mL 3mL 無
底物B 6mL 3mL 無
終止液 6mL 3mL 無
封板膜 2張 2張 無
說明書 1份 1份 無
自封袋 1個 1個 無
豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
注意事項
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
試劑準備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
1. 標準品復(fù)溶:試劑盒提供6管標準品,每管已標定濃度,并且凍干。實驗前在每個標準品管中加入0.5mL樣本稀釋液,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動助其溶解,使其恢復(fù)為每個標準品管身標注的濃度。
2. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4-5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
實驗結(jié)果計算
以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值
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