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人免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒應(yīng)用方法

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  • 更新日期:2023-10-10 16:02
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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱: 人免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
英文名稱: Human immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit
種屬: 人
保存溫度: 2-8℃
樣本類型: 血清、血漿、唾液和 其他生物液體

產(chǎn)品詳情:免疫球蛋白 G (IgG)是一種抗體,它是由四條肽鏈組成的蛋白復(fù)合物 ——兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈排列而成的一個(gè) Y 型抗體單體。每個(gè) IgG 都有 2 個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。 IgG 是血液和細(xì)胞外液的主要抗體,可以控制人體組織的感染。血漿 B 細(xì)胞可產(chǎn)生并釋放 IgG 分子。IgG 是能夠通過(guò)人類胎盤的免疫球蛋白,從而給子宮內(nèi)的胎兒提供保護(hù)。從獻(xiàn)血者的血漿中提取的 IgG 抗體可用作靜脈注射免疫球蛋白,來(lái)治療免疫缺陷、自身免疫性疾病和感染性疾病。

檢測(cè)原理:本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人IgG  單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)孵育,樣本中存在的IgG 與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素 (streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中IgG 濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在 450 nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度值。                                                                                  

實(shí)驗(yàn)方法:雙抗夾心ELISA(定量)                                                                                                                         

樣本類型:血清、血漿、細(xì)胞上清、組織等相關(guān)生物樣本。                                                                                                 

規(guī)格型式:96孔板、48孔板,可拆卸              

保存條件:試劑盒未拆開(kāi),2-8℃保存。已拆開(kāi),標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存,其它2-8℃℃保存。                                                                           

有效期:6個(gè)月。                      

檢測(cè)范圍:3.13-200ng/ml。   

靈敏度:0.1ng/mL。敏感性/低檢測(cè)濃度計(jì)算方式:敏感性等于20個(gè)空白對(duì)照孔的平均O.D.值加上2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差后對(duì)應(yīng)的濃度。樣品的O.D.讀數(shù)只有在高過(guò)敏感性指標(biāo)的時(shí)候才具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。                                                                

變異系數(shù):板內(nèi)變異系數(shù)<10%,板間變異系數(shù)<15%。           

回收率:三組已知的高、中、低濃度樣品,進(jìn)行五次回收率評(píng)估,回收率在85%-115%之間。

需用戶自己提供的實(shí)驗(yàn)器材和試劑:              
1. 96孔讀板儀器。
2. 自動(dòng)洗板機(jī).
3. 移液器和槍頭。建議使用多通道移液器/排槍。
4. Eppendorf 管。
5. 額外洗板緩沖液 (neutral PBS 或 TBS。試劑盒內(nèi)提供足量。如需額外緩沖液可參考如下配方)。
0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*樣品準(zhǔn)備的相關(guān)試劑也不含在試劑盒中。
 
 
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