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草酸銨結(jié)晶紫染色液使用步驟

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  • 更新日期:2021-10-20 15:35
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詳細介紹
中文名稱:草酸銨結(jié)晶紫染色液
規(guī)格:100ml
儲存條件:室溫,避光,24個月
用途:改良的細菌革蘭染色
注意事項:conn改良Weigert革蘭染色液的一種

簡介:
草酸銨結(jié)晶紫染色液也稱為龍膽紫,甲基紫10B,是一種三苯甲烷類染料,常用于革蘭氏染色來進行細菌分類,或者用于細胞或組織學(xué)染色。結(jié)晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一種組織或細胞染色時常用的可以把細胞核染成深紫色的染色液。草酸銨結(jié)晶紫染色液是革蘭氏染色法中的一種成分,主要由草酸銨、結(jié)晶紫、乙醇等組成。革蘭陽性菌染色中,細胞經(jīng)草酸銨結(jié)晶紫染色后再經(jīng)Gram碘液處理,形成不溶性復(fù)合物,該復(fù)合物不能通過細胞壁,不易被脫色,所以保持紫色。染色后細菌與環(huán)境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,而用以分類鑒定。結(jié)晶紫是一種堿性染料,可以和細胞核中的DNA結(jié)合,從而產(chǎn)生細胞核染色。

使用方法
1. 樣品處理
1)石蠟切片:二甲苯脫蠟5-10 min;換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10 min;乙醇5 min;90%乙醇
2 min;70%乙醇2 min;蒸餾水2 min。
2)冰凍切片:蒸餾水2 min。
2)組培細胞:用4%多聚甲醛固定10 min以上(可根據(jù)具體實驗選擇其他的固定劑)。蒸餾水洗滌2 min。
換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2 min。

2. 結(jié)晶紫染色
1)待檢樣本經(jīng)以上方法處理后,直接加入結(jié)晶紫染色液室溫染色10 min(染色液需要覆蓋住樣本,具體的染色時間可根據(jù)需要的染色結(jié)果進行調(diào)整)。
2)倒去染色液,用蒸餾水充分洗滌直至沒有染料被洗下來。
3)室溫晾干(可能需要過夜)。
4)光學(xué)顯微鏡下觀察并拍照。

注意事項
1) 初次使用本品建議先取1-2個樣品做預(yù)實驗。
3) 結(jié)晶紫對人體有害,請注意適當防護。
4) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
 
 
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