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淀粉樣物質(zhì)染色液(甲紫法)實(shí)驗(yàn)步驟

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  • 更新日期:2021-10-14 15:09
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詳細(xì)介紹
中文名稱:淀粉樣物質(zhì)染色液(甲紫法)
產(chǎn)品規(guī)格:2x50mL
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:顯示淀粉樣蛋白/物質(zhì)
注意事項(xiàng):非剛果紅染色,有效成分為甲紫,需用熒光顯微鏡觀察

產(chǎn)品說明書:
淀粉樣物質(zhì)是一種無固定形狀的細(xì)胞外嗜酸性物質(zhì),可存在于不同的組織、器官導(dǎo)致的疾病稱為淀粉樣變。淀粉樣物質(zhì)主要是由蛋白質(zhì)構(gòu)成,該蛋白大部分排列成反向的β-折疊層結(jié)構(gòu)。在電子顯微鏡下,淀粉樣物質(zhì)呈原纖維排列,病例材料中為大量細(xì)胞外的、不分支的細(xì)絲,大多隨機(jī)排列。用于識(shí)別淀粉樣物質(zhì)的組織學(xué)方法有甲紫染色、剛果紅染色、偏振光顯微鏡觀察等。目前研究發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)的甲紫染色法靈敏度低、特異性差,經(jīng)典的而且有效的方法是剛果紅染色,1922年Bennhold發(fā)現(xiàn)了剛果紅可以用于活體內(nèi)淀粉樣物質(zhì)的鑒別,并應(yīng)用到組織切片,后來經(jīng)過Highman改良,染色。

淀粉樣物質(zhì)染色液(甲紫法)主要由甲紫染色液、酸性分化液組成,是經(jīng)Jurgens改良的一種異染色液,其染色原理是蛋白樣物質(zhì)中的酸性黏多糖與甲紫起異色反應(yīng)。其優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便省時(shí),其缺點(diǎn)是染色后的切片難以保存。

自備材料:
10%中性福爾馬林固定液、甘油明膠

操作步驟(僅供參考):
1、常規(guī)固定,常采用10%中性福爾馬林,常規(guī)脫水包埋,切片厚度4μm,常規(guī)脫蠟至水。
2、入甲基紫染色液3min,無需水洗,滴加酸性分化液分化,直至無染色液脫出。
3、稍水洗,甘油明膠封固。

染色結(jié)果:
淀粉樣物質(zhì)  紅色至紫紅色
細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、結(jié)締組織  藍(lán)色至深淺不一的紫藍(lán)色

注意事項(xiàng):
1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,否則影響染色效果。
2、盡量采用浸染,如果滴染,應(yīng)置于濕盒防止溶液揮發(fā)。
3、酸性分化液應(yīng)密閉保存,分化步驟很重要。
4、染片不能經(jīng)乙醇脫水,否則易出現(xiàn)無法上色的問題。
5、粘液物質(zhì)甲紫染色時(shí)也會(huì)呈異染顆性紅色,應(yīng)注意鑒別。
6、在鏡下觀察異染性反應(yīng)時(shí),應(yīng)注意把藍(lán)色濾光片移去。
7、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
 
 
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