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伊紅染色液(進(jìn)口水溶)實驗步驟

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  • 更新日期:2021-07-23 15:35
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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:伊紅染色液(進(jìn)口水溶)
規(guī)格:100ml/500ml
分類:HE染色
儲存條件:室溫,避光,3個月
用途:又稱曙紅染色液,常規(guī)切片HE染色
注意事項:主要由進(jìn)口伊紅、防腐劑等組成。

簡介:伊紅(Eosin)又稱曙紅,屬人工合成染料中的呫噸類染料,為桃紅色或粉紅色的粉末。分子式為C20H6O5Br4Na2,分子量為691.86。伊紅適宜與蘇木精配合染色以顯示正?;虿±斫M織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。水溶性伊紅Y含有一個醌型苯環(huán)的發(fā)色團(tuán)和兩個形成鈉鹽的酸性助色團(tuán)(R-COONa、R-ONa)。這種形成鹽類的酸性染料在水中溶解時解離為帶負(fù)電荷的色酸部分(R-COO-、R-O-),即染料的有色部分和帶正電荷的鈉離子部分(Na)。染色時伊紅Y帶負(fù)電荷的色酸部分與組織內(nèi)帶正電荷的物質(zhì)以離子鍵的形式結(jié)合而顯色。

伊紅染色液(EosinYStain)采用特有防腐劑,操作簡單,不使用汞、甲醇等有毒試劑,可以用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色??梢院兔庖邿晒馊旧蛎庖呓M化染色配合使用。一方面可以在伊紅染色后進(jìn)行免疫熒光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫組化染色后再進(jìn)行伊紅復(fù)染。本染色液可以重復(fù)使用,直至認(rèn)為效果不佳時再換用新的染色液,染色后細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。

自備材料:
1、蒸餾水
2、4%多聚甲醛
3、系列乙醇

操作步驟(僅供參考):
1、樣品處理
a)對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟。換用新鮮的二甲苯,再脫蠟。
b)對于冰凍切片:蒸餾水2min。
c)對于培養(yǎng)細(xì)胞用多聚甲醛固定。蒸餾水洗滌。換用新鮮的蒸餾水,再洗滌。

2、伊紅染色
對于上述處理好的樣品,伊紅染色液染色0.5~2min(根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。如果需要直接觀察,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。
注:如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染,參考上述步驟在其它染色完成后進(jìn)行伊紅染色.

3、脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色
a)脫水、透明、封片:乙醇脫水。換用新鮮的乙醇再脫水。二甲苯透明。換用新鮮的二甲苯,再透明。用中性樹膠或其它封片劑封片。顯微鏡下觀察,細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。
b)進(jìn)行其它染色:如果進(jìn)行免疫熒光染色,或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色,在伊紅染色液染色后:乙醇洗滌。PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡。進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色。
 
 
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