FRTL-5 大鼠甲狀腺細(xì)胞
Catalogue No.: C336
Product Format: a T25 flask
Culture Properties：貼壁
Complete Growth Medium: 89%L15+10%FBS+1%雙抗
Atmosphere: air,
Application: Cells and cancer research
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
Compo
Item Specifications
a T25 flask 2X106
Manual 1 copy
Operation steps for cell culture
1. 吸走用于培養(yǎng)基，加入 3-5mL PBS 后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞；
2. 吸干凈 PBS 后加入 1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面，
培養(yǎng)瓶放 37 度培養(yǎng)箱消化；
（細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感，消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者
傳代后不長(zhǎng)。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時(shí)即可終止，禁止消化
到細(xì)胞完全漂浮?；靹蚣?xì)胞時(shí)盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）
3. 加入 6-8ml 完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻；
4. 將混勻的細(xì)胞 1000rpm（約 150g）離心 3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸 37 度培養(yǎng)
箱繼續(xù)培養(yǎng)；
傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定，大部分細(xì)胞適用
1:3-1:4 傳代，生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以 1:2 傳代。
Cell cryopreservation
1.凍存液：92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4 度 10min，-20 度 2h，-80 過夜后液氮保存。
