上海逸晗生物科技有限公司代理不同品牌價(jià)格檔次的ELISA試劑盒?？贵w產(chǎn)品等, 品種多，質(zhì)量好，價(jià)格實(shí)惠，并且還提供代檢測(cè)服務(wù)。
本公司的更多產(chǎn)品，請(qǐng)點(diǎn)擊公司網(wǎng)址：http://www.yihanbio.com/
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馬伊氏錐蟲酶聯(lián)免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
藥品名稱：
通用名：馬伊氏錐蟲酶聯(lián)免疫分析試劑盒
使用目的：
本試劑盒用于定性測(cè)定馬血清，血漿及相關(guān)液體樣本中伊氏錐蟲。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒采用間接法測(cè)定標(biāo)本中馬伊氏錐蟲。用純化的伊氏錐蟲溫育后，加入生物素標(biāo)記的抗IgG抗體，再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中馬伊氏錐蟲的存在與否。， 抗體包被微孔板，制成固相抗體，與樣品中伊氏錐蟲
試劑盒組成
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1
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20倍濃縮洗滌液
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50ml×1瓶
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8
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樣品稀釋液
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6ml×1瓶
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2
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鏈霉親和素-HRP
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6ml×1瓶
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9
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陰性對(duì)照
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0.5ml×1瓶
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3
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酶標(biāo)包被板
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12孔×8條
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10
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陽(yáng)性對(duì)照
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0.5ml×1瓶
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4
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生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體
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6ml×1瓶
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11
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密封袋
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1個(gè)
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5
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顯色劑A液
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6ml×1瓶
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12
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封板膜
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3張
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6
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顯色劑B液
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6ml×1/瓶
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13
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說明書
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1份
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7
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終止液
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6ml×1瓶
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標(biāo)本要求
1．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
操作步驟
1. 編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照（不加樣品，生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體，鏈霉親和素-HRP，其余操作相同）1孔
2. 加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，37℃溫育45分鐘。
3. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)4次，拍干。
5. 加生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體：每孔加入生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體50μl（空白孔除外）。37℃溫育30分鐘
6. 洗滌：操作同4。
7. 加鏈霉親和素-HRP：每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP（空白孔除外），輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
8. 洗滌：操作同4。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
結(jié)果判定：
試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為馬伊氏錐蟲陰性
陽(yáng)性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為馬伊氏錐蟲陽(yáng)性
注意事項(xiàng)
1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物請(qǐng)避光保存。
6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)，參考波長(zhǎng)為630nm
7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時(shí)必須注意安全。
規(guī)格：
96人份/盒
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(gè)月
