NHS-瓊脂糖凝膠FF價格,現(xiàn)貨促銷NHS-瓊脂糖凝膠FF

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供應各種純度的試劑:優(yōu)級純、分析純、化學純、試劑級、基準試劑、實驗純、教學試劑、高純試劑、色譜純、光譜純、電子純。
產品名稱:NHS-瓊脂糖凝膠 FF價格(NHS Activated Sepharose FF)
規(guī)格:1 ml,10 ml,100 ml,1L
保存:異丙醇,-20℃保存。
運輸:2~25℃、常壓、避光。
目 錄 號:Suer0010
保 質 期:1 年。
相關介紹:
NHS-瓊脂糖凝膠 FF價格 是一種將瓊脂糖凝膠微球用 NHS 活化形成的生物親和層析分離介質。該產品保留了瓊脂糖的親水性及大網架結構,同生物活性大分子有很好的相容性,具有載量高、非特異性吸附少和流速快等特點。本活化的瓊脂糖凝膠能溫和地同氨基基團反應,特別適合偶聯(lián)抗體、鏈霉親和素、酶和核酸等功能性生物大分子。
技術指標:
外觀 乳白色半透明凝膠
基質 6%瓊脂糖凝膠
配體 NHS
配體密度 25 μmol/ml
蛋白質載量 ≥10 mg 目標蛋白/ml
粒徑范圍 45~165 μm
工作溫度 4~40℃
基質 pH 穩(wěn)定性 3~12(長時間);2~14(短時間)
基質化學穩(wěn)定性 在常用水相緩沖液、1 M 乙酸(pH4.0) M、6鹽酸胍和 70%乙醇中穩(wěn)定。
應用實例: NHS-瓊脂糖凝膠 FF 偶聯(lián)抗體
NHS-瓊脂糖凝膠 FF價格實驗步驟:
1、配制抗體:取 100 mg IgG用 10 ml 偶聯(lián)緩沖液(0.2 M NaHCO3,0.5 M NaCl,
pH8.3)溶解。
2、偶聯(lián)反應:取 10 ml NHS-瓊脂糖凝膠 FF,用 50 ml 的 1 mM HCl 分三次清洗去
除保存液,之后立即加入到抗體偶聯(lián)溶液中,4℃振蕩偶聯(lián) 6 h 或者偶聯(lián)過夜。
3、封閉:上述溶液過濾,用 50 ml偶聯(lián)緩沖液清洗偶聯(lián)后的凝膠,用 10 ml封閉緩
沖液(0.2 M NaHCO3,0.5 M NaCl,0.5 M 乙醇胺,pH8.3)于室溫振蕩 4 h(或者過夜)
以封閉未偶聯(lián)的基團,之后用 20 ml蒸餾水清洗干凈即可。
4、檢測:用 SDS-PAGE 檢測偶聯(lián)前后的反應液并計算偶聯(lián)效率,偶聯(lián)好的填料根據(jù)配基特性測定功能和載量。
注意事項:
1、 如對配基的穩(wěn)定性不夠了解,可以選擇不同 pH 值緩沖液和不同溫度,用 0.5~1 ml配基相應濃度的溶液,在無填料的條件下模擬偶聯(lián)反應,觀察溶液是否會產生沉淀。有沉淀產生說明偶聯(lián)效果不佳,可適當降低緩沖液 pH 值或溫度。同時可以添加約5%的甘油或 PEG 保護蛋白,避免產生沉淀。
2、 如果偶聯(lián)的配基不穩(wěn)定,可于 4℃振蕩偶聯(lián) 1~12 h 以維持配基的活性。偶聯(lián)配基后應盡快清洗填料,避免配基在高 pH 條件下失活。
3、 穩(wěn)定的配基可以直接溶于 0.2 M NaHCO3,可適當提高偶聯(lián)溫度(如室溫)將偶聯(lián)時間縮短至 1~2 h。
4、 根據(jù)偶聯(lián)蛋白的穩(wěn)定性選擇合適的偶聯(lián) pH 值和溫度。偶聯(lián)較適 pH 值為 pH7.5~9.0,室溫或 4℃均可。提高偶聯(lián)溫度能夠提高配基的偶聯(lián)效率。
5、 偶聯(lián)蛋白溶液的濃度以 5~15 mg/ml 為佳。偶聯(lián)凝膠體積和配基溶液的體積比以1:0.5~1:2.0 為佳。
6、 偶聯(lián)緩沖液可以是碳酸鹽、硼酸鹽和磷酸鹽緩沖液,但不能使用氨基緩沖體系(如 Tris-HCl 緩沖液)。
7、 封閉緩沖液一般使用帶氨基的小分子試劑,如乙醇胺、Tris 等。于 pH8~9、室溫條件下封閉數(shù)小時可完全封閉。推薦封閉緩沖液:0.5 M 乙醇胺,0.5 M NaCl,pH8.3或 0.1 M Tris-HCl,pH8.5。
8、 偶聯(lián)中盡量使用溫和的混勻方式,如振蕩、翻轉和旋轉等。如使用磁力攪拌器或者機械攪拌,需要降低攪拌速度,使填料能夠混勻完全懸浮即可。避免劇烈攪拌導致凝膠微球破碎。
9、 NHS-瓊脂糖凝膠 FF 需現(xiàn)取現(xiàn)用,避免取出后放置時間過長導致活性降低。本產品可在 異丙醇中,于-20℃密閉環(huán)境中存放 2 年。
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1ml、5ml、10ml |
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丁基-瓊脂糖凝膠FF |
Butyl Sepharose Fast Flow |
1ml、5ml、10ml |
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