1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。

2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。

3.置于-80超低溫冰箱中放置過(guò)夜。

4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。

5同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。

注意事項(xiàng)：

1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)Z好戴上手套操作。

2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過(guò)久，低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi)，是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。

3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量，及時(shí)添加。