酶聯(lián)免疫吸附實驗中血清的詳細處理

  ELISA試劑盒行將已知的抗原或抗體吸附在固相載體外表，使酶符號的抗原抗體反響在固相外表進行的技能。該技能可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、活絡(luò)、簡潔、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點。酶聯(lián)免疫吸附實驗中血清的詳細處理保存意見：

  (1)要留意防止呈現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有相似過氧化物的活性，因而，在以HRP為符號酶的ELISA測定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相，然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。

  (2)ELISA試劑盒標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。

  (3)ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染，一則細菌的成長，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性干擾。

  (4)血清標(biāo)本如是以無菌操作別離，則能夠在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長時間保存，應(yīng)在-70℃以下。

  (5)冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果，然后引起假陰性成果。此外，凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意，不要進行劇烈振動，重復(fù)倒置混勻即可。

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