北京百奧萊博供應(yīng)的結(jié)核桿菌單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒用于科學(xué)研究，我公司的結(jié)核桿菌單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括結(jié)核桿菌(TB)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：結(jié)核桿菌(TB)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號：SYA488
產(chǎn)品規(guī)格：48次/盒|96次/盒

一、簡介
本試劑盒用一對結(jié)核桿菌特異性引物，結(jié)合一條特異性探針，用熒光PCR技術(shù)對結(jié)核桿菌核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測，用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。

二、用途
該試劑盒適合于檢測外周血等樣本中結(jié)核桿菌DNA，用于結(jié)核病等疾病的輔助診斷，其檢測結(jié)果僅供臨床參考。

三、試劑盒組成(40T/Kit)
組份 數(shù)量 規(guī)格
TB反應(yīng)液(TB-qPCR MIX) 1管 560μL/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合液(Enzymes MIX) 1管 40μL/管
陰性對照(NTC) 1管 50μL/管
TB陽性對照(TB-PTC) 1管 50μL/管

四、熒光PCR儀器適用范圍：
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他熒光定量PCR檢測儀。

五、儲存條件及有效期：
本試劑盒于-18℃以下保存，有效期為12個(gè)月。

六、樣品采集、前處理與DNA提取
6.1 樣品采集
6.1.1 適用標(biāo)本類型：痰、支氣管灌洗液、尿、糞、腦脊液或胸、腹水，其他肺外感染可取血、相應(yīng)部位分泌液或組織細(xì)胞等。
6.1.2 標(biāo)本采集
6.1.2.1 組織：取發(fā)病組織約1g，置入1.5mL潔凈EP管，立即送檢；
6.1.2.2 血液：無菌注射器抽取外周血1-2mL注入EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管；
6.1.2.3 液體標(biāo)本：取0.5-1mL左右，置入1.5ml潔凈EP管，立即送檢；
6.2 樣本前處理：
6.2.1 腦脊液和胸、腹水：13000rpm離心3min沉淀集菌，去上清；
6.2.2 痰、支氣管灌洗液、尿、糞等污染標(biāo)本：經(jīng)4%NaOH(痰和堿的比例為1:4，尿、支氣管灌洗液和堿的比例為1:1)處理15min；尿標(biāo)本加5%鞣酸、5%乙酸各0.5mL于錐形量筒內(nèi)靜置，處理后吸去上清，沉淀直接用于提取結(jié)核桿菌DNA或者經(jīng)酸中和后接種培養(yǎng)，然后再對培養(yǎng)物提取DNA。
6.3 DNA提取
6.3.1 對上述處理好的樣本加入40uL核酸提取液，100℃恒溫處理10min，13000rpm離心5min，取上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
6.3.2 DNA的提取也可以采用商業(yè)化DNA提取試劑盒。
 注：陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取)，直接取4μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議zuì后在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。

七、檢測步驟：
7.1 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(TB-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合液 1μL N×1μL
總量 15μL N×15μL
計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入21μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品/陰性對照(NTC)/陽性對照(TB-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入實(shí)時(shí)熒光PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

八、結(jié)果分析
8.1 結(jié)果分析條件設(shè)定
直接讀取檢測結(jié)果。基線和閾值設(shè)定原則根據(jù)儀器噪聲情況進(jìn)行調(diào)整，以閾值線剛好超過正常陰性樣品擴(kuò)增曲線的zuì高點(diǎn)為準(zhǔn)。
8.2 試驗(yàn)成立判定
（1） 陰性對照(NTC)：不應(yīng)產(chǎn)生任何的擴(kuò)增曲線。
（2） 陽性對照(TB-PTC)：均產(chǎn)生擴(kuò)增曲線。
（3） 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則，此次試驗(yàn)視為無效。
8.3 結(jié)果判定
（1） 在試驗(yàn)成立的條件下，Ct值≤35的樣本為陽性，表明結(jié)核桿菌核酸陽性。
（2） Ct值顯示為無的樣本為陰性樣本，表明結(jié)核桿菌核酸陰性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判為可疑樣品。對于可疑樣品，先看擴(kuò)增曲線。如果擴(kuò)增曲線為對數(shù)擴(kuò)增曲線，則為可疑陽性，否則判為陰性。
（4） 對于可疑陽性樣品，重新抽提核酸，再次進(jìn)行結(jié)核桿菌real time PCR檢測。如果重復(fù)擴(kuò)增曲線為對數(shù)擴(kuò)增曲線，判為樣本陽性，表明結(jié)核桿菌核酸陽性；否則判為樣本陰性。

九、注意事項(xiàng)：
（1） 初次使用前請仔細(xì)閱讀說明書。并嚴(yán)格按照說明書步驟操作。
（2） 所有使用的離心管應(yīng)高壓滅菌，而且必須不含DNA酶。
（3） PCR操作應(yīng)嚴(yán)格按照要求分區(qū)(試劑配制區(qū)、標(biāo)本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)等)，防止實(shí)驗(yàn)室污染。
（4） 樣本提取、試劑配置、加樣需在不同區(qū)的超凈工作臺進(jìn)行，以免污染。
（5） 試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，并按照衛(wèi)生部《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。


根據(jù)您的關(guān)注的結(jié)核桿菌(TB)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：



名稱：禽流感病毒N1亞型(AIV-N1)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒
貨號：SYA328
規(guī)格：48次/盒|96次/盒

名稱：禽流感病毒H9亞型(AIV-H9)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒
貨號：SYA340
規(guī)格：48次/盒|96次/盒

名稱：新城疫病毒(NDV)通用型單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒
貨號：SYA344
規(guī)格：48次/盒|96次/盒
一、簡介：
新城疫病毒實(shí)時(shí)熒光qRT-PCR檢測試劑是按照美國農(nóng)業(yè)部(USDA)的檢測標(biāo)準(zhǔn)而制備的商業(yè)化檢測試劑盒。本試劑盒為中的探針報(bào)告基團(tuán)為6-FAM，淬滅基團(tuán)為MGB。

二、用途：
本試劑盒適用于檢測禽類喉咽棉拭子、泄殖腔棉拭子、各種組織樣品、尿囊液及細(xì)胞培養(yǎng)液等。可用于新城疫毒株感染的輔助診斷、監(jiān)測及流行病學(xué)調(diào)查，其檢測結(jié)果僅供參考。

三、試劑盒組成：(50T/Kit)
組份 數(shù)量 規(guī)格
熒光qRT-PCR反應(yīng)液(NDV-qRT-PCR MIX) 1管 700μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 50μL/管
無核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
陰性對照(NTC) 1 管 50μL/管
陽性對照(NDV-PTC) 1 管 50μL/管

四、儲存條件及有效期
本試劑盒于-18℃以下保存，有效期為6個(gè)月。

五、熒光PCR儀器適用范圍
ABI系列，Roche系列等熒光定量PCR檢測儀等。

六、樣品的采集與RNA提取
6.1 樣品的采集
按照標(biāo)準(zhǔn)《新城疫診斷技術(shù)》(GB/T 16550-2008)和《新城疫檢疫技術(shù)規(guī)范》(SN/T 0764-2011)進(jìn)行樣品的采集。
6.2 樣品RNA提取
可按常規(guī)方法提取，也可采用商品化試劑盒提取病毒RNA。
（1） 取滅菌的1.5 mL Eppendorf離心管，做好標(biāo)識。
（2） 每管加入600 μL裂解液，分別加入被檢樣本200 μL，再加入200 μL氯fǎng，混勻器上振蕩混勻5 s，于4℃ 12000r 離心15 min。
（3） 取無RNA酶的1.5 mL Eppendorf離心管，加入-20℃預(yù)冷400μL異丙醇，吸取步驟(2)各管中的上清液轉(zhuǎn)移至相應(yīng)的管中，避免吸出中間層，顛倒混勻。
（4） 于4℃ 12000 r離心15min，棄上清，倒置于吸水紙上，沾干液體；加入600μL 75％預(yù)冷乙醇，洗滌。
（5） 于4℃ 12000 r離心10min，棄上清，倒置于吸水紙上，沾干液體。室溫干燥5 min～10 min。
（6） 加入10μL無核酸降解酶的水，溶解管底的RNA，5000 r離心5 s，冰上保存?zhèn)溆?。若需長期保存須放置-70℃冰箱。
 注：陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取)，直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議zuì后在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。

七、檢測步驟：
7.1 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光qRT-PCR反應(yīng)液(NDV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 19 μL N×19 μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 20 μL N×20 μL
計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入20μL，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(NDV -PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 real time RT-PCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
反轉(zhuǎn)錄(Reverse Transcription) 1循環(huán) 45℃ for 5 min
預(yù)變性 1循環(huán) 94℃ for 30 sec
PCR 擴(kuò)增 40循環(huán) 94℃ for 5 sec
60℃ for 30 sec
在60℃ 延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。

八、結(jié)果分析：
8.1 結(jié)果分析條件設(shè)定
直接讀取檢測結(jié)果?；€和閾值設(shè)定原則根據(jù)儀器噪聲情況進(jìn)行調(diào)整，以閾值線剛好超過正常陰性樣品擴(kuò)增曲線的zuì高點(diǎn)為準(zhǔn)。
8.2 試驗(yàn)成立判定
（1） 陰性對照(NTC)：不應(yīng)產(chǎn)生任何的擴(kuò)增曲線。
（2） 陽性對照(NDV-PTC)：均產(chǎn)生擴(kuò)增曲線。
（3） 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足 ，否則，此次試驗(yàn)視為無效。
8.3 結(jié)果判定
（1） 在試驗(yàn)成立的條件下，Ct值≤35的樣本為陽性，表明NDV核酸陽性。
（2） Ct值顯示為無的樣本為陰性樣本，表明NDV核酸陰性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判為可疑樣品。對于可疑樣品，先看擴(kuò)增曲線。如果擴(kuò)增曲線為對數(shù)擴(kuò)增曲線，則為可疑陽性，否則判為陰性。
（4） 對于可疑陽性樣品，重新抽提核酸，再次進(jìn)行NDV qRT-PCR檢測。如果重復(fù)擴(kuò)增曲線為對數(shù)擴(kuò)增曲線，判為樣本陽性，表明NDV核酸陽性；否則判為樣本陰性。

九、注意事項(xiàng)：
（1） 初次使用前請仔細(xì)閱讀說明書。并嚴(yán)格按照說明書步驟操作。
（2） 所有使用的離心管zuì好高壓滅菌，而且必須不含RNA酶。
（3） PCR操作應(yīng)嚴(yán)格按照要求分區(qū)(試劑配制區(qū)、標(biāo)本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)等)，防止實(shí)驗(yàn)室污染。
（4） 樣本提取、試劑配置、加樣需在不同區(qū)的超凈工作臺進(jìn)行，以免污染。
（5） 試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對待，按照衛(wèi)生部《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。


關(guān)注結(jié)核桿菌(TB)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒，的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：

貨號	名稱	規(guī)格
SYA340	禽流感病毒H9亞型(AIV-H9)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒	48次/盒|96次/盒
SYA368	禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(REV)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒	48次/盒
SYA378	禽流感通用型/新城疫病毒(AIV-M和NDV)通用型雙重?zé)晒釶CR檢測試劑盒	48次/盒
SYA384	禽流感病毒H3亞型(AIV-H3)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒	48次/盒
SYA390	禽滑液支原體單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒	48次/盒
SYA435	豬出血性魏氏梭菌(CW)單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒	48次/盒|96次/盒

如果您覺得“SYA488 結(jié)核桿菌單重?zé)晒釶CR檢測試劑盒”描述資料不夠齊全，請聯(lián)系我們獲取詳細(xì)資料。(聯(lián)系時(shí)請告訴我從給覽網(wǎng)看到的，我們將給您最大優(yōu)惠！)
本頁鏈接：http://www.mingjiewl.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8567958.html
已經(jīng)有1128位訪客查看了本頁.