北京百奧萊博供應(yīng)的10×WB洗滌液(TBS)用于科研目的，10×WB洗滌液(TBS)是我司眾多優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)研究之一，質(zhì)量堪比同類進口產(chǎn)品，價格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括10×WB洗滌液(TBS)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：10×WB洗滌液(TBS)
英文名稱：Western Blot Wash Buffer(10×) in TBS
產(chǎn)品貨號：KFS070
產(chǎn)品規(guī)格：100ml

WB洗滌液可以用于WB時一抗或二抗孵育后的洗滌。適當?shù)南礈炜山档捅尘?，增強信噪比?br />
取適量10×WB洗滌液，用去離子水10 倍稀釋。在一抗或二抗孵育結(jié)束后，加入適量的WB洗滌液，使之能蓋住雜交膜，在搖床上緩慢搖動洗滌10-15 分鐘后，吸盡洗滌液，再加入新的WB洗滌液。共洗滌3 次，每次10-15 分鐘。然后進行后續(xù)的操作。

如果按照上述洗滌條件,WB的染色結(jié)果背景仍然較高，可以適當延長洗滌時間，并增加洗滌次數(shù)。通常，延長洗滌時間或增加洗滌次數(shù)不會對WB的結(jié)果產(chǎn)生負面影響。

注意事項
1. WB洗滌液經(jīng)過濾除菌處理，使用過程中應(yīng)盡量避免細菌污染。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

儲存：RT，有效期12個月。

根據(jù)您的關(guān)注的10×WB洗滌液(TBS)，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：

貨號	名稱	規(guī)格
BTN90610	卵白蛋白標準品(2mg/mL)	1mL
WE0269	GST瓊脂糖凝膠	10ml
RFT083	超敏BalbECL發(fā)光液	25ml|100ml|500ml
KFS066	二抗稀釋液(Western Blot)	100ml
SY0298	BCA蛋白濃度測定試劑盒(增強型)	500T|2500T|5000T
SY0325	全能核酸酶	25KU|50KU|100KU
SY0326	細胞核/細胞漿蛋白抽提試劑盒	50T|100T

關(guān)注10×WB洗滌液(TBS)，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：



名稱：強RIPA裂解液
貨號：BTN131006
規(guī)格：250mL
RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等實驗。本產(chǎn)品裂解強度較強，對膜蛋白、胞漿蛋白、核蛋白、胞漿磷酸化蛋白和各種轉(zhuǎn)錄因子均有很好的效果，本產(chǎn)品含有各種蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制劑，能有效防止各種蛋白酶對目的蛋白的降解。我公司各種RIPA裂解液產(chǎn)品特點見下表：

產(chǎn)品名稱	RIPA裂解液(強)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)
有效裂解成分	1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.5% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.25% deoxycholate
裂解強度	強	中	溫和
對膜蛋白的提取	很好	較好	一般
對胞漿蛋白的提取	很好	很好	很好
對核蛋白的提取	很好	較好	較好
胞漿磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好
細胞核轉(zhuǎn)錄因子提取	很好	很好	很好
含蛋白酶抑制劑	是	是	是
含磷酸酯酶抑制劑	是	是	是
主要用途	WB,IP	WB,IP	WB,IP,co-IP

儲存條件：低溫運輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解RIPA裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的zuì終濃度為1mM。
2. 裂解細胞
2.1 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后，細胞就會被裂解。
2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g離心3～5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意：通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。

對于組織樣品：
1. 把組織剪切成細小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的zuì終濃度為1mM。
3. 按照每20毫克組織加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g離心3～5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
注意：RIPA裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會出現(xiàn)一小團透明膠狀物，屬正常現(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。在不檢測和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清用于后續(xù)實驗；如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物，隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子，例如NF-kappaB、p53等時，通常不必進行超聲處理，就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。

備注：
1.為取得zuì佳的使用效果，盡量避免過多的反復凍融?？梢赃m當分裝后使用。
2.裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品，建議使用BCA蛋白濃度測定試劑盒，不建議使用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。

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