SY0456 牛血清白蛋白

產(chǎn)品簡介
牛血清白蛋白由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供,用于科研目的,我公司的牛血清白蛋白品質(zhì)上佳,經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn),已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括牛血清白蛋白(低內(nèi)毒素)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:牛血清白蛋白(低內(nèi)毒素)
英文名稱:BSA, Low Endotoxin
產(chǎn)品貨號:SY0456
產(chǎn)品規(guī)格:25g
本品為低內(nèi)毒素的牛血清白蛋白(BSA, Low Endotoxin),經(jīng)熱休克法處理外,另還經(jīng)活性炭,去離子和透析處理,保證產(chǎn)品中內(nèi)毒素含量低于1.0 EU/mg。在內(nèi)毒素水平敏感的細(xì)胞培養(yǎng)中,該產(chǎn)品可作為內(nèi)源性脂肪酸,微量元素和生長因子的天然載體蛋白;也非常適合用作無血清或化學(xué)成分限定的細(xì)胞和組織培養(yǎng)中的營養(yǎng)物質(zhì)的載體蛋白;還是一種有效成分來穩(wěn)定和稀釋敏感蛋白。也可用于ELISA等診斷檢測。
牛血清白蛋白,英文名稱為Bovine Serum Albumin,也稱Bovine albumin,或Cohn Fraction V,簡稱BSA。BSA有著其廣泛的實驗室應(yīng)用,在免疫實驗中常用作封閉劑,包括ELISA、WB(Western Blot)。作為載體蛋白,將其交聯(lián)于半抗原和其他弱抗原可以使它們在抗體生產(chǎn)中具有更強(qiáng)的免疫原性。在限制性內(nèi)切酶消化反應(yīng)中,BSA常常被用作一些酶的反應(yīng)穩(wěn)定劑,并且能防止它粘附到管壁和槍頭上。BSA也常用于生物制藥的生產(chǎn)過程或者作為營養(yǎng)物用于細(xì)胞和微生物培養(yǎng)。除此之外,還作為蛋白定量檢測的標(biāo)準(zhǔn)品使用。我們提供的BSA產(chǎn)品,使用優(yōu)質(zhì)牛血漿,利用熱休克法(Heat Shock)法制備而成。
CAS:9048-46-8
分子量(M. Wt.):66 kDa
外觀:米色(灰白色)粉末
濕度::<5.0%
灰分(Ash):<2.0%
pH值(pH Value):6.5-7.5
白蛋白(Albumin):≥98%(電泳)
總蛋白(Protein):≥97%
重金屬(Heavy me
內(nèi)毒素:<1.0 EU/mg
溶解性:易溶于水(7%(w/v)in water)
儲存條件:4℃密封,有效期至少5年
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名稱:Protein A瓊脂糖凝膠
貨號:WE0271
規(guī)格:5ml
本產(chǎn)品可從血清,腹水,細(xì)胞培養(yǎng)上清和細(xì)胞抽提物中分離和純化多種哺乳動物丌同亞型的抗體或包含抗體 Fc片段的基因工程重組蛋白。具有高IgG結(jié)合特異性,高流速,低Protein A-Agarose脫落等特點。
注意事項:
1、凝膠從冷室或冰箱中取出后在室溫下緩慢振搖恢復(fù)到室溫后裝柱,避免產(chǎn)生氣泡影響柱效。
2、裝柱時盡可能維持凝膠長徑比為5:3-2:1,長徑比過大將導(dǎo)致洗脫峰拖尾,洗脫體積增大;長徑比過小將導(dǎo)致樣品與填料接觸時間短,吸附不充分,填料吸附蛋白量小。
3、若上樣液中抗體濃度過高,應(yīng)使用平衡緩沖液稀釋至1-2 mg/ml,抗體濃度過高影響柱效。
4、可以采用降低上樣時的流速來增加樣品與填料接觸時間從而提高純化抗體量。
5、凝膠用低pH緩沖液洗脫時間應(yīng)盡可能短,洗脫后用中性緩沖液盡快中和至pH中性,以延長親和介質(zhì)的使用壽命。
6、洗脫后,應(yīng)立刻用如中和緩沖液將收集到的抗體溶液中和到中性(pH7.4左右),以利于維持抗體的生物活性,避免抗體失活。
7、填料使用后應(yīng)用0.1 M檸檬酸鈉緩沖液(pH3.0)做再生處理,長期采用端的洗脫條件將縮短親和介質(zhì)的使用壽命。
使用方法:
I 緩沖液的準(zhǔn)備
1、平衡緩沖液:純化不同動物和不同亞型抗體時所用平衡緩沖液是不同的,部分參照如下。
| 抗體 | 平衡緩沖液成分 |
| 人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b | 20 mM PBS,300 mM NaCl,pH7.4-8.5 |
| 人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG3 | 50 mM Tris-Cl,3 M NaCl,pH7.8-8.5 |
2、洗脫緩沖液:0.1 M檸檬酸鈉緩沖液,pH4.0。
3、再生緩沖液:1 M NaCl。
4、中和緩沖液:1 M Tris-Cl,pH9.0。
注意:
1)以上緩沖液使用前均需0.45μM濾膜過濾。
2)為提高抗體和介質(zhì)的吸附力??蛇m當(dāng)提高平衡緩沖液中的鹽濃度和ph值。
II 樣本制備
1、樣品用平衡緩沖液稀釋5-10倍。
2、細(xì)胞培養(yǎng)液中大量的血清蛋白會對親和層析造成一定的干擾,去血清處理或稀釋樣品將提高純化抗體收率。
注意:樣品在上柱前需0.45μM微孔濾膜過濾。
III 操作步驟
1、將Protein A-Agarose填料混勻后加入層析柱,室溫靜置10分鐘,待凝膠與溶液分層后,把底部的出液口打開,讓乙醇通過重力作用緩慢流出。
2、向裝填后的柱中加入3-5個柱床體積的超純水將乙醇沖洗干凈,用平衡緩沖液流洗5-10個柱床體積平衡柱子。
3、將樣品上柱,上樣流速60 cm/h。
4、平衡緩沖液再洗5-10個柱床體積,直至基線平穩(wěn)。
5、洗脫緩沖液洗脫,收集洗脫峰,用中和緩沖液將洗脫收集樣品中和到中性。
6、立即用5-10個柱床體積平衡緩沖液平衡柱子到中性。
7、再生緩沖液流洗3-5個柱床體積。先后用純水、20%乙醇分別流洗3-5個柱床體積。柱子置于2~8℃保存。
注意:收集洗脫峰時可以分階段收集到多個管中,zuì后根據(jù)測定結(jié)果重新調(diào)整收集方式。
8、本產(chǎn)品使用10次以上后先用20%乙醇洗5個柱床體積,再用70%乙醇洗脫5-10個柱床體積,再用20%乙醇流洗3-5個柱床體積。柱子置于2~8℃保存。
儲存條件:2~8℃,避免冷凍
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