酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒是高品質(zhì)的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于生化實驗研究等領(lǐng)域，酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)研究之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒
英文名稱：Yeast mitochondrial membrane protein extraction kit
產(chǎn)品貨號：HR8067
產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T

線粒體(mitochondria)是真核細(xì)胞中產(chǎn)生能量的重要細(xì)胞器。細(xì)胞中的能源物質(zhì)-脂肪、糖、部分氨基酸在此進(jìn)行zuì終的氧化，并通過偶聯(lián)磷酸化生成ATP，供給細(xì)胞生理活動之需。對線粒體結(jié)構(gòu)與功能的研究通常是在離體的線粒體上進(jìn)行的。
酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種酵母樣品中提取線粒體膜蛋白。提取過程簡單方便。
本試劑盒含有的獨特配方能夠有效溶解線粒體膜組份。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。
本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。
本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。
本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。
本試劑盒不能用于冷凍樣品的線粒體膜蛋白提取。
本試劑盒提取的蛋白樣本含有高濃度的鹽成分，不可直接用于2D電泳，如下游實驗需要直接用于等電聚焦、雙向電泳，請使用我公司其他貨號的試劑盒。也可以將zuì后樣品除鹽后再用于2D電泳，用脫鹽柱脫鹽處理(相關(guān)產(chǎn)品HR0389)。

儲存條件：提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前請仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書 ※ ※ ※
使用限制：本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
產(chǎn)品更新：我公司會更新或升級產(chǎn)品，以優(yōu)化和增強(qiáng)其使用性能，產(chǎn)品說明書會進(jìn)行相應(yīng)的版本更新。使用產(chǎn)品時，請參照隨產(chǎn)品附帶的說明書，不要參照網(wǎng)上下載的說明書，可能是不同的版本。需要zuì新電子版說明書時可以在收到產(chǎn)品后發(fā)郵件索取。
使用安全：使用時需要合適的實驗室外套，一次性手套。避免皮膚或粘膜與試劑接觸。如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應(yīng)立即用水沖洗。

注意事項：
1．正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得zuì佳實驗效果。
2．螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3．禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4．樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5．zuì好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底清除殘留清潔劑。
6．實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

試劑盒以外自備試劑和儀器：
● PBS緩沖液● 移液器、吸頭 ●離心機(jī)及離心管● 渦旋振蕩器 ● 振蕩器/脫色搖床 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事項：
● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
● 實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

1．酵母培養(yǎng)物，在4℃，5000g條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集酵母沉淀。
2．用PBS 洗滌酵母兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
3．每100μl體積酵母沉淀物中加入400μl酵母線粒體提取液A，混勻后，在30℃條件下保溫15分鐘。
【注】：
● 酵母數(shù)量根據(jù)實驗情況調(diào)整，每次的裂解液用量并不是一定的，請根據(jù)實際情況調(diào)整。
4．5000g條件下離心5-10分鐘，收集酵母沉淀。
5．用PBS 洗滌酵母一次，離心收集菌體。
6．酵母沉淀物中加入500μl酵母線粒體提取液B，混勻后，在37℃或室溫條件下輕微振蕩45-120分鐘。
【注】：
● 一般1小時左右即可。
7.在5000g條件下離心5-10分鐘，收集沉淀，棄上清。
8．沉淀用PBS 洗滌兩次。離心收集沉淀。
9．沉淀中加入400μl 酵母線粒體提取液C，高速渦旋15秒混勻，然后在振蕩器上輕輕振蕩20-40分鐘。
10．再次高速渦旋振蕩5秒，然后在4℃，500g條件下離心3分鐘。
11．將上清吸入另一干凈離心管，收集上清，棄沉淀。
12.在4℃，11000g條件下離心20分鐘。
13．棄上清，在沉淀中加入200-400μl冷的線粒體膜蛋白提取液D，混勻。
14.在4℃條件下輕輕振蕩20-30分鐘。
【注】：
● 此步振蕩完離心后，沉淀應(yīng)明顯大量減少，否則請延長冰浴裂解時間至30分鐘或更長，直至線粒體充分裂解。
15.在4℃，12000×g條件下離心5分鐘。
16．將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，37℃水浴5-10分鐘，37℃下1000g-2000g力離心5分鐘，此時溶液分為兩層(對著光線看)，下層是膜蛋白約為20-50μl。
【注】：
● 沒用37℃離心條件可以不離心，延長水浴時間至液體澄清透明，分層即可。
17.小心移除上層，留下下層即為線粒體膜蛋白。
18．用50-100μl膜蛋白溶解液E溶解下層，即得到酵母線粒體膜蛋白樣品。
19．將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?br /> 【注】：
● 建議用BCA法進(jìn)行蛋白定量。相關(guān)產(chǎn)品：HR0329。
●蛋白樣品－80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細(xì)菌污染。
常見問題分析：
●蛋白濃度低？
酵母線粒體膜蛋白豐度低，在條件允許的情況下，需要盡可能加大酵母細(xì)胞的上樣量。
處理部分組織樣本時可能沒有裂解完全，導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長試劑BCD的處理時間即可。zuì好在持續(xù)振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
●用什么方法定量蛋白？
建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。
● 提取的蛋白具有活性嗎？
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，沒有對蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。

根據(jù)您的關(guān)注的酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：

貨號	名稱	規(guī)格
BTN100908A	一站式長效期SDS-PAGE套裝A(>30KD)	30次
YT622	彩色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)(15-120kD)	200μl|600μl|3ml
YT629	預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(19-117kD)	200μl|1ml
SNM481	抗體稀釋液	100ml
RFT053	QuickLan蛋白染色液	500ml
RFT198	蛋白酶抑制劑混合物(植物蛋白提取用)	1ml|5×1ml

關(guān)注酵母線粒體膜蛋白提取試劑盒，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：


YT626 考馬斯亮藍(lán)G250 5g
WE0283 Tris-甘氨酸蛋白電泳液(pH8.3, 10×) 500ml
WE0314 免疫組化試劑盒(兔源一抗) 3ml
SNM413 膜蛋白、核蛋白和胞質(zhì)蛋白抽提試劑盒 50T
SNM422 X光膠片(5X7英寸) 100
SNM470 免疫組化用伊紅染色液 50ml
SNM479 AEC顯色試劑盒 1
RFT067 40％丙稀酰胺溶液(19:1) 100ml
RFT198 蛋白酶抑制劑混合物(植物蛋白提取用) 1ml|5×1ml

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