HpaII限制性內(nèi)切酶的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的工具酶產(chǎn)品，本制品僅用于生物化學(xué)研究方面，HpaII限制性內(nèi)切酶是我司眾多優(yōu)質(zhì)工具酶之一，質(zhì)量堪比同類進口產(chǎn)品，價格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括HpaII限制性內(nèi)切酶在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：HpaII限制性內(nèi)切酶
英文名稱：HpaII Restriction Endonuclease
產(chǎn)品貨號：SV0422
產(chǎn)品規(guī)格：10KU|10KU|2KU|1KU

在不同反應(yīng)緩沖液的活性:
BalbBuffer 1.1:
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重組酶、省時酶。
反應(yīng)條件:
CutSmart 緩沖液，37℃。
熱失活:80℃ 20 分鐘。
濃度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
對哺乳動物基因組DNA CpG甲基化敏感。
注意事項:
Hpall是Mspl的完全同裂酶。
當 KCl 濃度＞50mM 時，酶活性被抑制。

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名稱：M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶II(RNase H-)(逆轉(zhuǎn)錄酶)
貨號：YT394
規(guī)格：2000U|10KU|50KU
本品是一種經(jīng)過改造和優(yōu)化的M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶，具有正常的依賴于RNA或DNA模板的DNA聚合酶活性，能夠以RNA或DNA為模板，在引物存在的情況下進行互補DNA鏈的合成，即可以進行cDNA(complementary DNA)的鏈合成。

本產(chǎn)品是zuì常用的反轉(zhuǎn)錄酶之一，廣泛用于獲得總RNA或mRNA后cDNA條鏈的合成，后續(xù)可以用于PCR、real-time PCR也稱定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、cDNA的第二鏈合成以及cDNA文庫的構(gòu)建等。本品還可以通過反轉(zhuǎn)錄用于DNA探針的熒光、生物素、dì高辛或同位素標記等，也可以通過引物延伸(primer extention)來分析和研究RNA。

本產(chǎn)品無RNase H活性，反轉(zhuǎn)錄效率高、產(chǎn)物長度長。本產(chǎn)品與野生型M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶相比，無RNase H活性，不能選擇性剪切RNA和DNA雜合雙鏈中的RNA，從而有助于合成長度更長的cDNA。本產(chǎn)品經(jīng)測試可以輕松完成長度為8 kb及以下基因的反轉(zhuǎn)錄(參考圖1)，反轉(zhuǎn)錄的zuì大長度可以超過10kb。


使用本品反轉(zhuǎn)錄總RNA后，對于不同長度的cDNA進行PCR擴增后的電泳效果圖。圖中可見對于0.2-8kb的cDNA可以非常地被反轉(zhuǎn)錄。

本產(chǎn)品熱穩(wěn)定性高。zuì適反應(yīng)溫度為42-45℃，但當溫度達到50℃時仍具有很高活性，且可獲得較高產(chǎn)量的cDNA。


在不同溫度下的反轉(zhuǎn)錄效果。用從NIH3T3細胞抽提獲得的總RNA 500 ng，在20μl的反轉(zhuǎn)錄體系中按照圖中所示溫度進行反轉(zhuǎn)錄。反轉(zhuǎn)錄完成后取1μl反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品進行目的基因的PCR擴增和電泳。

本品是一種大腸桿菌重組高表達的的反轉(zhuǎn)錄酶，由于其表達量非常高，大大提高了本產(chǎn)品的。本反轉(zhuǎn)錄酶含有從Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase基因克隆的缺失RNase H domain的pol基因，并進行了突變優(yōu)化以提高其熱穩(wěn)定性、反轉(zhuǎn)錄效率和表達量。

酶活性定義：One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTTP into acid-precipitable material in 10 min at 37℃ using poly(A)·oligo(dT) 12-18 as template-primer。反應(yīng)體系為 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT, 0.5mM [3H]-dTTP and 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。

純度：不含DNA內(nèi)切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以滿足常規(guī)反轉(zhuǎn)錄合成cDNA條鏈等的需要。

酶儲存溶液：20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 300 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.01% NP-40 and 50% glycerol。

失活或抑制：80℃孵育10分鐘可以導(dǎo)致M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)失活；EDTA、EGTA等螯合劑、無機磷酸鹽或焦磷酸鹽以及聚氨(polyamine)對M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)有抑制作用。

本產(chǎn)品中M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)的濃度為200U/μl，用于體積為20微升的反轉(zhuǎn)錄體系時足夠進行10次反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

儲存條件：-20℃。

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