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產品詳情

SY0449 牛髓磷脂堿性蛋白

  • 產品/服務:SY0449 牛髓磷脂堿性蛋白
  • 型 號:SY0449
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2023-05-31
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數:857
產品簡介

牛髓磷脂堿性蛋白由專業(yè)試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科研目的,本品質量穩(wěn)定,價位合理,需要牛髓磷脂堿性蛋白等蛋白質研究產品的客戶,請到我公司官網聯系我們。...

產品詳細介紹

特別提示:包括牛髓磷脂堿性蛋白在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產品名稱:牛髓磷脂堿性蛋白
英文名稱:Bovine Myelin Basic Protein(MBP)
產品貨號:SY0449
產品規(guī)格:1mg

本品是從牛腦中提取的天然蛋白,以凍干粉形式提供。髓磷脂堿性蛋白(Myelin Basic Protein,MBP)是中樞神經系統及某些神經元髓鞘的主要蛋白成分,約占髓鞘總蛋白的30%,是髓鞘的整體骨架成分。它被大量用于在脫髓鞘病損中的研究。在脫髓鞘病損的病人腦脊液和頭部損傷的病人血清中,MBP量被檢測出異常。作為抗原,它可引起自身免疫性腦脊髓炎,該模型可用來研究多發(fā)性硬化癥。據報道,MBP會影響髓鞘中脂類與蛋白質的比例。此外,MBP在多個領域具有廣泛應用:是一種可能的神經受體;體外可引起淋巴細胞增殖;MAPK通路的重要底物。

中文別名:牛髓鞘堿性蛋白
英文別名:MBP from bovine
種屬:牛
分子量:約18.4 kDa,由170個氨基酸殘基組成的一條精氨酸甲基化的多肽
外觀:灰白色或黃色凍干粉
純度:經SDS-PAGE檢測,純度≥90%
溶解性:溶于水
儲存條件:-20℃,有效期4年

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名稱:植物葉綠體蛋白提取試劑盒
貨號:BTN130887
規(guī)格:15次
本試劑盒是結合植物葉綠體純化試劑盒和細菌蛋白質提取試劑盒而推出的新興產品,專門用于植物葉綠體蛋白的快速提取。

產品特點:
1. 即用型試劑盒,用戶不需要單獨配制各種溶液。
2. 本產品足夠15次提取,每次可處理30g葉片。
3. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D電泳、免疫印跡分析、蛋白活性測定和BCA法及Lowry法蛋白定量(不適用于Bradford法)。
4. 已經成功用于菠菜、大豆、萵筍、白菜、煙草和甜菜等植物,還可用于更多植物(可能需要優(yōu)化條件)。

試劑盒組成:
成份 規(guī)格
勻漿液成分一 250mL×2
勻漿液成分二(干粉) 3g
Percoll 60mL
帶柄尼龍濾膜 1個
植物葉綠體純化試劑盒 15次
溶液A 15mL
溶液B 1.5mL
說明書 1份


儲存條件:常溫運輸,4℃保存,保存期限一年。

使用方法:
注意:葉綠體對溫度高度敏感,所以整個操作必須在冰上或者在冷室進行,所用器皿和溶液均需要在4℃預冷。離心時一定要在4℃進行,離心力以g而不是rpm計算。如果需要研究葉綠體的功能,提取還需要在昏暗的光線條件下進行。

一:葉綠體的純化
1. 實驗前1-2天將植物放在暗室培養(yǎng)以減少葉綠體中淀粉顆粒的形成,否則離心時這些顆粒很容易使葉綠體破裂。葉片在實驗前需先用自來水洗凈,再用蒸餾水淋洗,去掉多余水分。如果葉片采集后不能立即處理,則保存時需要保持葉片濕潤,即使如此,葉片的放置時間也不能超過一天。
2. 新鮮(實驗當天)制備勻漿液:將自備的去離子水與勻漿液成分一按4:1的比例混合,然后在混合液中加入勻漿液成分二干粉到終濃度0.1%(每100mL中加入0.1 g干粉),搖晃溶解后所得溶液即為勻漿液,冰上預冷待用。一次實驗(從30 g葉片提取葉綠體)所需要的勻漿液體積跟材料不同而不同。
3. 新鮮采集植物葉片,快速去除葉脈并將葉片剪成1-3 cm2大小的碎片并浸泡在適量的預冷的勻漿液中(每克葉片加4mL勻漿液,但對煙草和大豆,每克葉片需要加6mL勻漿液)。
4. 將浸泡了葉片的勻漿液轉移到Waring勻漿機(即家用制備果汁的勻漿機)中,低速勻漿10秒,避免起泡沫。用玻璃棒把液面的碎片按入勻漿機底部后,再低速勻漿10秒。注意:除Waring勻漿機外,還可以選擇Dounce玻璃勻漿器,Polytron勻漿機和研磨(加玻璃珠)等裂解細胞的方法,但這些方法的單次處理量都比較小,需分成很多小份單獨勻漿,然后再匯集。
5. 用帶柄尼龍濾膜過濾勻漿液,可先將濾液收集到預冷的200mL量筒中,再等分到4個預冷的50mL的塑料離心管中(每個管中的濾液不要超過35mL)。帶柄尼龍濾膜后可反復使用。
6.在水平轉子離心機上4℃ 200 g離心3分鐘(對菠菜,白菜和萵筍材料)或400 g離心1分鐘(對甜菜材料),白色沉淀為未破裂的細胞或細胞核。
7. 將上清液(含葉綠體)轉移到一個新的、預冷的50mL塑料離心管中。
8.在水平轉子離心機上4℃ 1000 g離心7分鐘,小心棄上清,沉淀含葉綠體,呈淺綠色。
9.在沉淀中加入1.5mL預冷的勻漿液,手彈離心管底部使葉綠體重懸。注意:重懸時zuì好避免溶液起泡,也不要用槍頭吹打,否則葉綠體容易破裂。沉淀下有白色淀粉屬于正?,F象,但重懸葉綠體時避免將白色淀粉重懸。
10. 將4管葉綠體重懸液匯集(共約6mL),得到葉綠體粗提液,可直接用于后續(xù)的SDS-PAGE,Western,ELISA和蛋白組分析。
11. 如果需要以之為材料精提葉綠體,就需要用密度梯度離心法將完整的葉綠體和其他污染物進一步分離。具體操作步驟是:在50mL塑料離心管中先加入6mL勻漿液成分一和4mL Percoll,充分混合均勻。在其液面上小心鋪上葉綠體粗提液。在水平轉子離心機上4℃ 1000 g離心8分鐘,管底綠色沉淀為完整的葉綠體。小心將上清倒出后,用于葉綠體蛋白提取。

二:葉綠體蛋白質的提取
12. 將1mL的溶液A和100μL溶液B加入到葉綠體沉淀(約15mg濕重)中,吹打混勻。
13. 冰上放置30分鐘至1小時至溶液變清。
14. 4℃ 1,2000 g離心1分鐘。
15. 將上清液轉移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要進行SDS-PAGE電泳,可取部分樣品到離心管中,加入5×SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×),在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。

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